皮肤重叠扩张的极限以及相关组织学变化的研究

摘要

目的：观察实验动物皮肤经重叠扩张(overlappingtissueexpansion)达到极限扩张(extrematissueexpansionETE)状态时的皮肤扩张率、即时回缩率、皮肤厚度及组织学变化，将结果与常规扩张(routinetissueexpansionRTE)对比，以确定皮肤软组织的最大扩张率，推断限制皮肤扩张面积的因素。为临床进一步探索能够充分利用供区皮肤软组织的最佳扩张方法提供理论依据。 方法： 1试验动物 白色小家猪六头雌雄不限，称重编号。 2分组 于每头小家猪背部脊柱两侧设计4个对称分布的扩张区，共计24个扩张区，分为2组，极限扩张组(ETE组)和常规扩张组(RTE组)，于扩张区相似部位未扩张处取正常皮肤作为空白对照组(blankcontrolgroupBC组)。氯胺酮(20mg/kg)肌肉注射全身麻醉下在实验动物背部皮下浅筋膜深层埋植一枚或多枚皮肤软组织扩张器，在扩张皮瓣区文刺黑色方格，边长2cm，至埋置扩张器的腔隙边缘外13～15cm。 3扩张器植入及注水方法 ETE组植入两枚扩张器分别为70ml和50ml，重叠放置；RTE组常规植入70ml扩张器一枚。实验动物待切口愈合拆线后，扩张方法采用常规扩张：每3～5d氯胺酮(20mg/kg)肌肉注射麻醉下注水一次，每次注水量根据扩张皮瓣松弛度及扩张器的容积而定，以皮瓣指压反应4～5s为限。ETE组注水直至项部扩张区皮肤呈现菲薄透明、血运障碍、弹力明显下降为止；RTE组扩张区注水至扩张器额定容量72h后取材。 4取材 氯胺酮20mg/kg、安定1.5mg/kg、阿托品0.01mg/kg肌肉注射麻醉下将完成扩张的皮瓣项部最充分扩张部分切取送检。同时取相似部位未经扩张的正常皮肤作为对照，取下的标本分为两部分，分别以4％中性戊二醛和中性甲醛固定，送透射电镜检查和制作石蜡切片。其中石蜡切片分别作常规HE染色、维多利亚蓝染色。 5观测指标 (1)扩张率：待扩张完成后，以无弹性的棉布按照方格大小形状裁剪成布样，并将棉布图样描绘在硫酸纸上，通过硫酸纸称重间接反映其扩张面积与周边未经扩张区域的自然生长面积，计算皮瓣不同部位扩张率的变化。(2)即时回缩率：于各组扩张皮瓣项部取1cm×1cm皮瓣计算即时回缩率，同时取相邻部位未经扩张的正常皮肤作为对照。(3)光镜下观察常规HE染色切片的组织学变化，并应用显微标尺测量标本的真皮和表皮厚度；光镜下观察维多利亚蓝染色切片，比较各组标本真皮中胶原纤维、弹力纤维的组成变化。(4)透射电镜下观察表皮基底层和棘细胞层中的桥粒及半桥粒的变化、真皮中基质及成纤维细胞的亚细胞结构变化，对比各组之间的异同。 6统计学处理 应用SPASS11.5统计学处理软件，对试验结果进行统计学处理。 结果： 1扩张比率 ETE组扩张率为(508.91±82.99)％，RTE组扩张率为(110.86±14.6)％，ETE组扩张率大于RET组359.5％(P＜0.05)。 2即时回缩率 ETE组即时回缩率为(17.56±1.65)％，RTE组即时回缩率为(34.24±1.06)％，BC组即时回缩率为(21.13±0.86)％。各组间两两比较均有显著性差异(P＜0.05)。 3光镜观察 3.1HE染色及真皮、表皮厚度测定 光镜下放大100倍可见ETE组真皮层内可见广泛毛细血管出血，此现象在RTE组中未见。BC组真皮层厚度为2.393±0.128mm，表皮层厚度为0.09±0.0019mm。RTE组真皮层厚度为1.929±0.132mm，与BC组相比降低19.39％(P＜0.05)；表皮层厚度为0.188±0.0030mm，较BC组增厚108.89％(P＜0.05)。ETE组真皮层厚度与BC组皮肤相比降低79.57％(P＜0.05)，与RTE组皮肤相比厚度减低75％(P＜0.05)；表皮层厚度为0.180±0.0036mm较BC组皮肤增厚100％(P＜0.05)，但于RTE组相比无显著差异(P＞0.05)。 3.2维多利亚蓝染色 RTE组胶原纤维较正常组细小、间距扩大；ETE组胶原纤维更加细小，间距进一步扩大。RTE组弹力纤维增生；ETE组则含量减低且广泛断裂。 4电镜观察 ETE组表皮基底细胞和真皮中成纤维细胞的线粒体和粗面内质网等超微结构发生了明显的病理改变，并可见坏死灶散在分布。而RTE组中超微结构改变轻微，两组间对比差别显著。 结论：采用重叠扩张术可使皮肤达到扩张极限，当皮肤达到扩张极限时，出现一系列特有的病理改变。由于皮肤在扩张状态下增殖能力的限制，扩张极限是皮肤的固有特性，是其在持续机械扩张作用下的必然结果。皮肤达到扩张极限时扩张率远大于常规扩张，提示重叠扩张技术的扩张效率远大于常规扩张方法，因此具有很高的临床使用价值和良好的推广应用前景。

目录

摘要

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述 扩张后皮肤软组织的组织学及生物学变化

致谢

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