基质金属蛋白酶基因多态性与食管癌、贲门癌的关联研究

摘要

目的：基质金属蛋白酶 (metrix metalloproteinase，MMP)是一个具有降解细胞外基质功能的蛋白水解酶家族，在肿瘤发生和侵袭转移的过程中起着十分重要的作用。基质金属蛋白酶基因启动子区存在的多态性位点可通过调控基因转录或蛋白表达水平而影响肿瘤的发生和发展。本研究旨在探讨MMP-2启动子区-735bp C/T、MMP-12启动子区-82bp A/G、MIVIP-13 启动子区-77bp A/G 单核苷酸多态性 (singlenucleotide polymorphism，SNP) 与河北省食管癌、贲门癌高发区-磁县和涉县人群食管鳞状细胞癌(esophageal squamouscell carcinoma， ESCC)、贲门腺癌 (gastric cardiacadenocarcinoma，GCA)遗传易感性的关系。 方法：采用基于人群的病例-对照研究方法，收集559例肿瘤患者(316例ESCC，243例GCA)和609例健康对照个体的静脉抗凝血5mL，同时记录其病史、个人史、肿瘤家族史。以蛋白酶K消化-饱和氯化钠盐析法提取外周血白细胞DNA，用聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)-限制性片段长度多态性分析 (restriction fragment lengthpolymorphism analysis，RFLP) 方法对 MMP-2-735C/T、MMP-12-82A/G和MMP-13-77A/G三个SNP进行基因分型。 数据统计分析采用SPSS11.5 版软件包(SPSS Company，Chicago，Illinois，USA)进行，P<0.05认为有统计学意义。 对照组基因型频率进行Hardy-Weinberg平衡分析。病例组与对照组的基因型、等位基因频率分布比较采用行×列表卡方检验。单体型频率分析采用EH软件。以非条件Logistic回归法计算经经性别、年龄、吸烟状况、上消化道肿瘤(uppergastrointestinal cancers，UGIC) 家族史校正的相对风险度比值比(odds ratio，OR)及其95％可信区间(confidence interval，CI)。 结果：1 ESCC和GCA患者组中UGIC家族史阳性个体的比例(分别为49.4％和 50.2％)显著高于健康对照组(36.0％)(x<'2>=15.51 和 14.68，P=0.00)。表明UGIC家族史可显著增加ESCC、GCA的发病风险，经性别、年龄、吸烟状况校正后的OR值分别为1.74(95％CI=1.32～2.29) 和 D 1.77(95％CI=1.31～2.39)。 2 健康对照组中的MMP-2基因启动子区转录起始点上游735bp处C/T SNP的基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡 (P>0.05)。MMP-2基因-735 C/T SNP基因型和等位基因频率分布在ESCC、GCA患者组及健康对照组之间均无显著性差异 (P>0.05)。但与C/C基因型相比，携带T等位基因(C/T或T/T基因型)有降低GCA发病风险的趋势，经性别、年龄、吸烟状况、UGIC家族史校正后的OR值为0.73(95％CI=0.53～1.01)。根据个体吸烟状况进行分层分析发现，与C/C基因型相比，携带T等位基因(C/T或T/T基因型)显著降低非吸烟个体GCA的发病风险，经性别、年龄、UGIC家族史校正后的OR值为0.62(95％CI=0.39～0.98)。根据UGIC家族史分层分析的统计学结果未发现MMP-2基因-735C/T SNP对ESCC和GCA发病风险的影响。但与C/C基因型相比，携带T等位基因(C/T或T/T基因型)有降低UGIC家族史阳性个体GCA发病风险的趋势，经性别、年龄、吸烟状况校正后的OR值分别为0.64(95％CI=0.40～1.02)。 3 健康对照组中的MMP-12基因启动子区转录起始点上游82bp处A/G SNP的基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)。MMP-12基因-82A/G SNP基因型和等位基因频率分布在ESCC、GCA患者组和健康对照组之间均无显著性差异 (P>0.05)。根据个体吸烟状况以及UGIC家族史分层分析的统计学结果未发现MMP-12基因-82A/GSNP对ESCC和GCA发病风险的影响。但与A/A基因型相比，A/G基因型有增加吸烟个体GCA发病风险的趋势，经性别、年龄、UGIC家族史校正后的OR值为2.13(95％CI=0.94～4.83)。 4 健康对照组中的MMP-13基因启动子区转录起始点上游77bp处A/G SNP的基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)。MMP-13基因-77A/G SNP基因型和等位基因频率分布在ESCC、GCA患者组和健康对照组之间均无显著性差异(P>0.05)。根据个体吸烟状况进行分层分析发现，与A/G或G/G基因型相比，A/A基因型显著增加吸烟个体GCA的发病风险，经性别、年龄、UGIC家族史校正后的OR值为1.72(95％CI=I.02～2.87)。根据UGIC家族史分层分析未发现MMP-13基因-77A/G SNP对ESCC和GCA发病风险的影响。 5 应用EH软件对MMP-12基因-82A/G SNP和MMP-13基因-77A/G SNP进行的联合分析显示，MMP-12 A/MMP-13G单体型是人群中最常见的，占50.6％。单体型分布在ESCC、GCA患者组与健康对照组间均无显著性差异(P>0.05)。 结论：1 上消化道肿瘤家族史明显增加ESCC、GCA的发病风险。 2 MMP-2基因基因启动子区-735 C/T 多态可能与GCA发病相关，即与C/C基因型相比，携带T等位基因(C/T 或T/T基因型)有降低GCA发病风险的趋势，进一步分析发现，这种作用主要表现在非吸烟个体及UGIC家族史阳性个体。 3 MMP-12基因-82A/G SNP可能与吸烟个体GCA的发病风险相关，即与A/A基因型比较，A/G基因型有增加吸烟个体GCA发病风险的趋势。 4 MMP-13基因-77A/G SNP可能与吸烟个体GCA的发病风险相关，即与 A/G或G/G基因型相比，A/A基因型可显著增加吸烟个体GCA的发病风险。 5 MMP-12基因-82A/G SNP和 MMP-13 基因-77A/G SNP的单体型分布可能与ESCC、GCA的发病风险无关。

目录

摘要

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述：基质金属蛋白酶基因多态性与肿瘤关系的研究进展

致谢

个人简历