脓毒症早期大鼠NPY、下丘脑-垂体-肾上腺轴的变化及血必净对其的影响

摘要

目的：目前脓毒症的病死率高达30％-50％，一旦并发休克和多器官衰竭，其病死率可达80％-90％。临床流行病学资料显示，脓毒症是危重患者的主要死亡原因之一，现已成为进一步提高危重症救治成功率的最大障碍。然而迄今为止，脓毒症时机体的炎症反应机制还没有充分阐明，神经-内分泌-免疫网络调节理论的形成与出现为脓毒症发病机制的进一步认识提供了契机。在神经内分泌免疫网络研究中，越来越多的研究证明作为神经内分泌免疫网络中神经肽-Y(neuropeptideY，NPY)发挥着非常重要的作用，有研究证明先天免疫和后天免疫中，NPY发挥着多效性的作用；下丘脑-垂体-肾上腺(hypothalamic-pituitary-adrenal，HPA)axis轴作为应激的中心环节同样起着至关重要的作用，且HPA轴和NPY系统之间有着密切的联系。深入研究NPY系统与HPA轴及兔疫系统之间的相互调节机制有望开辟脓毒症临床干预的新途径。
　　 血必净注射液的主要有效成分包括红花黄色素A、川芎嗪、丹参素、阿魏酸、芍药苷、原儿茶醛。血必净注射液能在体内外有效拮抗内毒素，抑制体内多种炎性介质的病理生理作用，恢复受到抑制的免疫反应，对应激性脏器损伤具有良好的保护和修复作用。
　　 本研究利用盲肠结扎穿孔(cecalligationandpuncture，CLP)法复制大鼠脓毒症模型，探讨脓毒症早期大鼠血浆NPY与下丘脑组织促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin-releasinghormone，CRH)，血浆促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropichormone，ACTH)、皮质酮(cortisol，CORT)水平的变化规律，同时探讨血必净注射液干预后上述指标的变化，明确血必净对脓毒症早期大鼠血浆NPY与下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴的调节作用。
　　 方法：
　　 脓毒症动物模型的制备选用经典的盲肠结扎穿孔(CLP)法，并行颈动脉脉置管以备采血。健康雄性Sprague-Dawley大鼠40只，随机分为4组：空白对照组(Normalgroup):不给予任何处理，直接处死；假手术组(Sham（XBJgroup）：制模后即刻经尾静脉注射血必净4ml/kg。各组术后在腹部皮下注射生理盐水30ml/kg，补充术中丢失量和生理需要量。除空白对照组外，各组均于术后6小时经颈动脉取血3ml，离心后取血浆于-80℃冻存，放射免疫法测定血浆中NPY、ACTH、CORT的水平；并迅速留取下丘脑组织冻于液氮中，放射免疫法批量测定下丘脑组织匀浆中CRH的水平。
　　 数据统计分析采用SPSS13.0版软件包(SPSSCompany，Chicago，Illinois，USA)进行；数据均以均数±标准差((?)±s)表示，各组均数的比较行单因素方差分析(ANOVA)，P＜0.05为差异有统计学意义。
　　 结果：
　　 1实验动物一般情况的观察：假手术组大鼠术后清醒较快，活动灵活，自由饮水，剖腹未见腹水，无恶臭。氯化钠组动物术后苏醒延迟，精神萎靡，活动迟缓，精神较差，竖毛，呼吸急促，剖腹可见淡血性腹水多，恶臭，肠管水肿，有的盲肠末端发黑。血必净组动物与氯化钠组相比表现较轻。
　　 2各组大鼠血浆NPY含量的比较：氯化钠组血浆NPY含量(5304.231±557.200pg/ml)明显高于正常对照组（2226.968±179.429pg/ml,P＜0.01），假手术组（2693.453±98.455pg/ml,P＜0.05）及血必净组血浆NPY含量（2769.779±386.879pg/ml，P＜0.05）。假手术组及血必净组高于正常对照组(P＜0.05）：假手术照组与血必净组之间相比无统计学差异（P＞0.05）。
　　 3各组大鼠血浆CORT含量的比较：氯化钠组血浆CORT含量(30.660±1.548ng/ml)明显高于正常对照组（7.628±0.558ng/ml,P＜0.01）及假手术组（11.853±0.871ng/ml,P＜0.01）；血必净组血浆CORT含量(22.131±1.458ng/ml)明显低于氯化钠组(P＜0.01)；正常对照组与假手术组之间相比无统计学差异（P＞0.05）。
　　 4各组大鼠血浆ACTH含量的比较：氯化钠组血浆ACTH含量(26.260±1.634pg/ml)明显高于正常对照组（8.841±1.393pg/ml,P＜0.01）及假手术组（11.429±0.469pg/ml,P＜0.01）；血必净组血浆ACTH含量(26.260±1.634pg/ml)明显低于氯化钠组(P＜0.01)；正常对照组与假手术组血浆ACTH含量相比无统计学差异（P＞0.05）。
　　 5各组大鼠下丘脑组织CRH含量的比较：氯化钠组下丘脑组织匀浆中CRH含量(101.923±6.610ng/ml)明显高于正常对照组(61.653±6.051ng/ml,P＜0.05)和假手术组(66.653±4.035ng/ml,P＜0.05);血必净组下丘脑组织CRH含量(84.091±2.541ng/ml)明显低于氯化钠组（P＜0.05）；正常对照组与假手术组下丘脑组织匀浆中CRH含量相比无统计学差异(P＞0.05)。
　　 结论：
　　 1本实验采用CLP法可成功复制由腹腔感染导致的脓毒症大鼠动物模型。
　　 2脓毒症早期，血浆NPY、CORT、ACTH和下丘脑组织CRH水平是升高的，说明此时NPY系统与HPA轴均处于过度激活的状态。
　　 3血必净注射液能够下调NPY系统和HPA轴过度激活的状态，减轻全身炎症反应状态，改善临床表现。

目录

文摘

英文文摘

脓毒症早期NPY、大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴的变化及血必净对其的影响

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述 脓毒症与NPY、HPA轴的研究

参考文献

致谢

个人简历