体外循环回路对预充液中舒芬太尼浓度的影响

摘要

目的：通过测定离体预充时体外循环回路中舒芬太尼浓度的变化，来探讨体外循环回路系统是否对舒芬太尼有吸附作用。
　　 方法：本研究共分实验组（A组）和对照组(B组)两组。体外循环回路由成人大号鼓泡式氧合器、储血器、成人体外循环管路(内径10mm)、成人微栓滤器组成。实验组(A组n=6)：在体外循环设备中预充2000ml液体（1000ml乳酸钠林格氏液，1000ml琥珀酰明胶注射液）。4L·min-1转机，2L·min-1吹入氧气。温度维持在32℃～34℃，变温器维持。从氧合器加药口加入舒芬太尼15μg，预测浓度为7.5ng·ml-1，在转机之前快速给入。在加药后第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、20、30、40、50、60、70、80、90分钟从氧合器动脉端的三通抽取样品1.5ml放入一个1.5ml尖底硅硼酸玻璃离心管中。样品立即冷冻保存于-20℃冰上，直至分析。对照组(B组n=6)：在玻璃容器内按上述比例加入晶体液和胶体液共计2000ml，加入舒芬太尼15μg，使预测浓度为7.5ng·ml-1，温度维持在32℃～34℃，2L·min-1吹入氧气。在加药后第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、20、30、40、50、60、70、80、90分钟时取样品1.5ml放入一个1.5ml的尖底硅硼酸玻璃离心管中。样品于-20℃冰上保存，直至分析。
　　 采用气相色谱一质谱法分析药物浓度。制作标准曲线采用最小二乘法，应用芬太尼为内标。具体操作：采用二次萃取法，将1ml样品漩涡混匀，加入内标芬太尼10ng，漩涡混匀30s，然后加入2ml石油醚，漩涡10min，室温下平衡1min，取上层液转入一个干净的10ml玻璃离心管中，样品再加入2ml石油醚，漩涡10min，室温下平衡1min，取上层液再转入同一个干净的10ml玻璃离心管中放在氮吹仪上，在室温下用氮气吹干。残留物定容在200μl甲醇中，漩涡30s，混匀，转入500μl玻璃小管中，自动进样器设定在自动进样1μ1到程序升温器中分析。色谱条件设定为，色谱柱在进样前维持130℃保持平衡，在进样后保持此温度2.5分钟。接着柱温以50℃·min-1的速度由130℃升温到210℃，然后以6℃.min-1的速度由210℃升温到285℃，接着柱温以50℃.min-1由285℃跃升到320℃，并且在320℃保持2分钟。进样口被加热到290℃。转换线被加热到300℃。超纯氦气流速为1ml.min-1。采用离子选择(SIM)模式来提高检测程度的敏感性。选用EI源、离子源温度230℃、四级杆温度150℃、电子轰击能量70eV、倍增电压2112V、选择性离子监测模式(SIM)，测定芬太尼及舒芬太尼质荷比，测得峰面积，并通过标准曲线得到药品浓度。
　　 为评价本方法的可行性，本研究还测定了日间及日内精密度、方法回收率及萃取回收率。配制舒芬太尼浓度分别为0.2、0.3、0.5、1、5、10ng·ml-1的预充溶液样品，标本处理同上（n=6），对低、中、高3种舒芬太尼浓度(0.2，1，10ng·ml-1)样品分别于1天内进行5次处理测定与5天内5次处理测定，计算日内及日间精密度。同样处理此3浓度的样本各6份，按样品测定方法处理后进样，测定舒芬太尼对内标峰面积比。各浓度6份样品的测定结果取平均值后分别代入标准曲线，得到舒芬太尼浓度，并于预测浓度相比，计算方法回收率。另用配制相应浓度的舒芬太尼和内标液，不经萃取直接进相同量的样，测定其舒芬太尼对内标峰面积比，计算萃取回收率。
　　 结果：
　　 1、以舒芬太尼与芬太尼的峰面积比(Y)为纵坐标，舒芬太尼的浓度(X)为横坐标，绘制标准曲线，计算得回归方程：Y=0.1625X+0.0316，r=0.9987，(n=6)P＜0.01。结果舒芬太尼溶液浓度在0.2～10ng.ml-1范围内，线性关系良好。在本实验条件下，舒芬太尼的最低检测限为：0.02ng·ml-1。在0.2、1、10ng·ml-1三种浓度时，萃取回收率分别为83.38±3.91％、87.04±3.05％、88.96±2.69％；精密度为4.69％、3.58％、3.02％。方法回收率分别为98±6.09％、97±3.69％、112±5.72％;精密度为6.21％、3.80％、3.02％。日内精密度为5.85％、3.51％、3.11％；日间精密度为7.56％、5.26％、6.49％。本方法用芬太尼做内标，舒芬太尼提取效果好，样品中杂质无干扰，样品中的内源性物质与舒芬太尼及内标物能很好的分离，不干扰舒芬太尼的测定。舒芬太尼的保留时间为8.28min，芬太尼的保留时间为7.68min，二者波形均良好。
　　 2、对照组(B组)中舒芬太尼的浓度较为稳定，虽然较预测浓度有所下降，但无显著性差异。实验组（A组）中，循环开始后，舒芬太尼的浓度首先显著下降。随转机时间的增加，浓度开始回升接近至转机前的水平，7分钟左右时浓度在整个实验过程最高，然后浓度又缓慢下降，直至最低，保持较稳定。在实验最后阶段，A组的浓度为1.82±0.19ng·ml-1，与初始预测浓度相比有显著性改变；而B组的浓度为7.49±0.02ng·ml-1，与初始预测浓度相比无显著性意义。
　　 结论：
　　 1、建立了一种稳定的实验方法，气相色谱质谱联用检测舒芬太尼浓度，最低检测限达到0.02ng·ml-1。
　　 2、目前临床应用的体外循环回路对舒芬太尼有明显吸附作用。
　　 3、离体体外循环对舒芬太尼的浓度影响较大，提示临床麻醉时及时调整麻醉深度。

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文摘

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体外循环回路对预充液中舒芬太尼浓度的影响

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述 芬太尼类药物药代动力学、药效学特点及在心脏手术麻醉中的应用

参考文献

致谢

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