245例大肠埃希菌临床分离株药敏分析及anr基因的检测

摘要

目的：近年来，大肠埃希菌的耐药性越来越严重，及时了解其耐药规律和趋势，能为临床合理选用抗生素提供依据。喹诺酮类药物是全人工合成的抗菌药物，被普遍用于临床治疗各种感染性疾病，其作用机制是：通过外膜孔蛋白和磷脂渗透进入细菌，并作用于DNA旋转酶，干扰细菌DNA复制、修复和重组。但随着这类药物的广泛使用，其耐药性也日趋严重，细菌对喹诺酮类药物的耐药机制主要由染色体介导，它包括药物作用靶位的改变、外膜通透性降低、主动外排泵亢进三个方面，1998年，Martinez-Martinez等在1株肺炎克雷伯菌中发现了qnr基因，其编码的蛋白Qnr能保护喹诺酮类药物作用的靶位点DNA促旋酶和拓扑异构酶Ⅳ，使喹诺酮类药物不易与其结合，从而导致药物治疗失败。该基因由质粒所携带，可以在同种或不同细菌之间水平传播，引起细菌耐药性的快速、广泛传播，临床危害性更大。这种新的细菌耐药机制称之为质粒介导的喹诺酮类抗菌药物耐药(plasmid-mediated quinolone resistance，PMQR)。质粒介导的喹诺酮耐药机制补充了传统的细菌对喹诺酮耐药途径，使细菌对喹诺酮耐药形式多样化。qnr基因在世界以及国内各地已有不少报道，且各地区间的流行情况及亚型的分布存在很大差异，本研究旨在了解衡水地区大肠埃希菌的药敏情况以及qnrA、qnrB、qnrS的存在情况和其耐药特征，以更好的为临床用药提供依据。
　　 方法：我们收集了哈励逊国际和平医院微生物实验室2008年12月-2010年6月间所有送检大肠埃希菌株245例进行检测分析，采用肉汤稀释法测18种抗菌药物最低抑菌浓度(MIC)并计算其MIC50和MIC90;采用聚合酶链反应(PCR)检测qnr基因；琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增产物分子量，PCR阳性扩增产物经过DNA测序，并在GenBank对比确定基因亚型。
　　 结果：抗生素敏感试验结果显示，亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦对大肠埃希菌敏感，哌拉西林、头孢唑林、头孢呋辛、头孢哌酮、头孢噻肟、头孢吡肟、头孢他啶、氨曲南、庆大霉素、阿米卡星、环丙沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星、米诺环素、呋喃妥因对大肠埃希菌的耐药率分别为84.9％、74.2％、75.5％、80％、77.6％、37.9％、43.7％、51％、55.9％、20.8％、77.1％、73.9％、70.2％、59.2％、2.4％。245例大肠埃希菌中检出5株存在qnrB基因，占2.0％，1株存在qnrS基因，占0.4％。
　　 结论：以上研究表明，我院检出的大肠埃希菌存在多重耐药，245例菌中，仅对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦普遍敏感。对喹诺酮类耐药菌株中，有qnrB和qnrS基因存在，由于该基因由质粒介导，可水平传播，所以迫切需要提高对其造成耐药性广泛传播趋势的警觉，临床医生需做好患者的适当隔离防护，避免造成大范围的传播。另外，随着喹诺酮类药物应用的不断增加，qnr阳性菌株仍将可能不断增加，可能出现更多的亚型，且不同菌种间也会出现qnr基因，因此加强临床用药监管刻不容缓。

目录

文摘

英文文摘

245例大肠埃希菌临床分离株药敏分析及qnr基因的检测

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述 质粒介导的喹诺酮类耐药的研究进展

参考文献

致谢

个人简历