天冰调督胶囊对激怒应激大鼠情感行为及P物质的影响

摘要

目的:观察天冰调督胶囊对应激条件下大鼠进食量,饮水量,嗜欲比,情感行为,空间记忆能力的影响和胃窦部,下丘脑P物质的改变。探讨肝胃不和证的实质,从神经生化角度揭示其作用机理。
　　 方法:将60只wista清洁级雄性大鼠(购于河北医科大学,体重200±20g)随机分为6组,每组10只,即正常组(A),模型组(B),柴胡疏肝散组(C),黛力新组(D),天冰调督胶囊低剂量组(E),天冰调督胶囊高剂量组(F)每组大鼠自由饮水进食。饲料由河北医科大学实验中心提供。每天早上9点测量其进食量和饮水量。用长海绵钳夹大鼠尾部外1/3处,令其激怒,并与笼内其他老鼠撕打,使全笼老鼠激怒。每鼠刺激一次,每次30分钟内连续刺激,每日刺激4次。连续刺激七天。刺激后合笼饲养半小时,然后每笼一只单笼饲养。七天后通过对大鼠饮食,体重的测量和行为变化的观察来确定造模是否成功。行为上刺激组的大鼠明显易怒,经常在笼中撕咬。平时则情绪低落,食欲下降,进食量减少。与正常组相比,各个刺激组将大鼠毛发没有光泽,呈现枯黄样改变。对大鼠体重及进食量进行单因素方差分析,证实刺激组与正常组之间体重和进食量之间存在差异(P＜0.05),证实造模成功。之后停止对各组大鼠的刺激,正常组和造模组每日给予2ml蒸馏水灌胃,柴胡疏肝散组则将柴胡疏肝散原方煎煮后浓缩,制成1.75g/ml的浓缩液,每日灌胃量2ml/只,黛力新组用10％阿拉伯胶混悬液配成含药浓度5mg/ml的混悬液,每日灌胃量2ml/只。天冰调督胶囊组低剂量组用10％阿拉伯胶配成含药浓度40mg/ml的混悬液,每日灌胃量2ml/只。天冰调督胶囊高剂量组用10％阿拉伯胶配成含药浓度80mg/ml的混悬液,每日灌胃量2ml/只。治疗期间每组每天给予500g的鼠粮,于第二天测量鼠粮剩余量。采用两瓶法比较两组大鼠每天摄入液体的总量。一瓶为自来水,一瓶为蔗糖水。每天给予250ml的液体,于第二天测定各自的剩余量。并对模型组与正常组的嗜欲比进行比较。嗜欲比=每日饮用蔗糖水的量/饮用自来水的量+引用蔗糖水的量。连续灌胃7天后将所有大鼠禁食24h。用免疫组化法观察各组间P物质阳性产物的差异。于治疗后第5天对所有大鼠开始进行旷场试验和拒俘行为观察,同时进行抬高迷宫实验和y迷宫测试,顺序为先进行旷场试验和拒俘行为测试,然后进行抬高迷宫实验,最后进行交替刺激Y迷宫实验。
　　 结果:
　　 1：大鼠进食量:正常组进食量比较稳定;造模期间各刺激组食量均明显下降,与正常组相比有明显差异。经过治疗后,各治疗组与正常组相比,进食量无明显差异(P＞0.05),各治疗组与模型组相比,具有显著差异(P＜0.05)。
　　 2：液体摄入量和嗜欲比:模型组和正常组相比,日平均饮水量明显下降,具有显著差异(P＜0.05),各治疗组和模型组相比,饮水量增多,差异具有统计学意义。和正常组相比,模型组嗜欲比明显下降,差异具有统计学意义(P＜0.05)。
　　 3：旷场试验和拒俘反应结果:模型组与正常组相比,旷场活动性积分明显提高,具有显著性差异(P＜0.05),各治疗组与模型组相比,积分明显下降,具有显著差异(P＜0.01-P＜0.05)。拒俘反应积分模型组与正常组相比,具有明显差异,(P＜0.05),各治疗组与模型组相比,具有明显差异(P＜0.05)。
　　 4：抬高迷宫实验结果:模型组与正常组相比,开放臂中逃避时间明显增加,差异显著(P＜0.05),各治疗组与模型组相比,开放臂中逃避时间减少,差异具有统计学意义(P＜0.01-P＜0.05)。模型组与正常组相比,进入开放臂次数明显增加,差异具有统计学意义(P＜0.05),黛力新组和天冰调督胶囊各组与模型组相比,进入开放臂次数明显减少,差异具有统计学意义(P＜0.05),其他各组两两比较无差异。
　　 5：Y迷宫实验结果:模型组与正常组相比,第1天和第2天选择错误数均有明显增加,差异明显(P＜0.01),治疗后各组选择错误数比模型组明显减少,差异具有统计学意义(P＜0.05)。
　　 6：P物质阳性产物:模型组与正常组相比,胃窦部P物质阳性产物明显减少,差异具有统计学意义(P＜0.05),黛力新组,柴胡疏肝散组,天冰调督胶囊组与模型组相比,P物质阳性产物明显增多,差异具有统计学意义(P＜0.01),其他各组无明显差异(P＞0.05)。其中,从均数看,天冰调督胶囊高剂量组最高,为(84.51±11.26),模型组与正常组相比,下丘脑腹侧核,海马CA1区P物质阳性产物明显减少,差异具有统计学意义(P＜0.01),各治疗组与模型组相比,下丘脑腹侧核,海马CA1区P物质阳性产物明显增多,差异具有统计学意义。其中天冰调督胶囊高剂量组下丘脑腹侧核P物质光密度最高为34.68±8.76,海马CA1区光密度(18.78±4.23)也为最高。
　　 结论:
　　 1：夹尾刺激后大鼠食量减少,情绪低落,状态萎靡不振,较好的模拟了人类肝胃不和证的状态,初步认为该模型与中医临床肝胃不和证有一定的相似之处。
　　 2：激怒大鼠存在胃窦部和下丘脑腹侧核,海马CA1区P物质减少的现象。
　　 3：天冰调督胶囊能明显改善大鼠进食量,改善大鼠的焦虑和抑郁状态,可作为临床用药依据之一。
　　 4：天冰调督胶囊能提高模型大鼠胃窦部和大脑P物质含量,这可能是该药提高模型大鼠胃动力和改善大鼠情绪异常的物质基础。

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结果

附图

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讨论

结论

参考文献

综述 功能性消化不良的中医治疗

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