箬叶多糖对宫颈癌抑制作用的实验研究

摘要

宫颈癌是一种严重危害女性健康的生殖系统恶性肿瘤，在全球妇女恶性肿瘤中仅次于乳腺癌。临床上主要采取手术、放化疗等综合治疗。但是，大多数抗肿瘤药物对肿瘤细胞和人体正常细胞的选择性较低，因此在临床应用过程中不良反应广泛且严重，加之肿瘤细胞对药物的敏感性不同以及耐药性的产生，以致使恶性肿瘤的化疗效应受到很大的限制。
　　 现代研究表明，中药的多种成分有抗肿瘤的作用，包括蛋白质类活性成分、蟾蜍甾二烯类活性成分、多糖类活性成分、萜类活性成分、黄酮类活性成分、生物碱类活性成分、苷类活性成分等。其中多糖也是当今抗肿瘤新药发展的方向之一。
　　 中医药治疗肿瘤多从整体考虑，有抑制肿瘤、提高免疫力、增强体质、强化耐力、缓解毒性等作用，并且可以增强化学药物的疗效，具有较好的临床应用前景。中药在治疗肿瘤方面有独特的优势，通过多靶点、多途径、多方面共同作用，其抗肿瘤机制包括免疫调节、诱导凋亡、促分化、抗转移、抗耐药性、增效减毒等方面。随着对中药抗肿瘤研究的深入，以传统中药为来源，寻找中药抗肿瘤活性成分和明确其抗肿瘤作用机制越来越受到医学界的关注。
　　 近年来，大量研究表明中药多糖具有增强机体免疫功能、抗肿瘤、抗病毒、抗衰老、等多种生物学功效，而且对机体几乎没有毒性，故对中药多糖生物学功效的研究愈来愈引起国内外研究学者的兴趣，它已成为当代生物学的热门领域。
　　 箬叶是禾本科植物箬竹的叶。《本草纲目》记载其功能为清热解毒，现代医学表明箬叶具有清热止血、解毒消肿之效，可以治疗吐血、下血、小便不利、喉痺、痈肿等病症。箬叶中含有多种维生素、氨基酸、茶多酚、矿物质、多糖、黄酮类物质和各种芳香成分。现已证实箬叶及箬竹根所含的多糖，在体内对实验动物均有抗肿瘤活性。
　　 目的：探讨箬叶多糖在体外、体内的抗宫颈癌活性，为其临床应用提供理论基础。
　　 方法：采用人宫颈癌Hela细胞和小鼠移植性宫颈癌U14细胞作为实验模型，研究箬叶多糖体外、体内抗宫颈癌活性。体外实验采用MTT法、台盼蓝拒染法检测箬叶多糖对人宫颈癌Hela细胞增殖的抑制作用，DNA琼脂糖电泳检测诱导细胞凋亡情况，并观察细胞形态变化。体内实验采用U14小鼠移植瘤模型，观察箬叶多糖的体内抗肿瘤作用。
　　 结果：箬叶多糖对体外培养的Hela细胞抑制作用较强，台盼蓝拒染法测得100mg/mL的箬叶多糖对Hela细胞体外增殖的抑制率为45.24％。(与阴性对照组相比，P＜0.01)；MTT(四甲基偶氮唑盐)法测得25mg/mL、50mg/mL、100mg/mL、200mg/mL的箬叶多糖对Hela细胞增殖的抑制率分别为24.18％、31.26％、40.58％、56.45％。而且同一浓度的箬叶多糖对Hela细胞增殖的抑制率随着作用时间的延长而增加，显示良好的量效关系和时效关系；DNA琼脂糖凝胶电泳结果表明Hela细胞经箬叶多糖作用后，DNA出现断裂，呈现不同长度的断裂条带，相差约为180-200bp的整倍数。即为“DNALadder”。形态学观察到细胞凋亡。而且箬叶多糖在体内对荷瘤小鼠的瘤重有一定的抑制作用。采用U14小鼠移植瘤模型，以0.1mL/10g剂量灌胃给药，观察箬叶多糖的体内抗肿瘤效果，结果显示箬叶多糖低(100mg/kg)、中(200mg/kg)、高(400mg/kg)剂量组对荷瘤小鼠的瘤重都有一定的抑制作用，以高剂量组抑瘤作用更明显，表明箬叶多糖的抗癌活性与剂量相关。
　　 结论：箬叶多糖对体外培养的宫颈癌Hela细胞有较强的抑制作用并且在体内可以抑制肿瘤细胞的生长。