对2型糖尿病大鼠模型血清胰岛素水平及胰腺β细胞mRNA表达的研究

摘要

近年来，糖尿病已经成为危害我国乃至全世界人类健康的重要疾病之一。世界范围内约有1.7亿患者，其中2型糖尿病(T2DM)占90％以上[1]。目前，中国已取代印度，成为全球糖尿病第一大国。而且，中国糖尿病高危人群也在扩大，约有1.5亿。虽然经过及时有效的治疗可以严格控制血糖，延缓和（或）防止糖尿病各种并发症的发生，提高患者生存率，但是这毕竟给患者带来经济及精神上的压力。因此，寻求有效、合理的预防措施以减少糖尿病的发病率具有重要意义。
　　 不同种属动物的T2DM模型已被证实早期有不同程度的胰岛素水平升高。但是对于胰岛素水平的较远期研究较少，本实验预对此问题进行研究。
　　 目的:观察T2DM大鼠模型胰岛素水平的变化。
　　 方法:80只健康雄性Sprague Dawley(SD)大鼠（购于河北医科大学动物实验中心）随机分为4组，每组20只。
　　 Ⅰ组高糖高脂组:高糖高脂饲料喂养。
　　 Ⅱ组实验组:高糖高脂饲料喂养6周，腹腔注射Streptozocin(STZ)(30mg/Kg)。
　　 Ⅲ组普通饲料组:普通饲料喂养。
　　 Ⅳ组普通饲料+STZ组:普通饲料喂养6周，腹腔注射STZ(30mg/Kg)。
　　 本实验采用高糖高脂饲料喂养SD大鼠，6周后腹腔注射STZ30mg/Kg，以72小时血糖≥11.1mmol/L，并持续7天，同时出现多饮、多食、多尿症状为模型制备成功。采用怡成血糖仪检测血糖，采用大鼠胰岛素ELISA检测试剂盒测定血清胰岛素含量，RT-PCR测定胰腺β细胞mRNA表达水平。分别于造模前（0天）、造模后3天、4周、8周、12周、16周、18周、28周测定血清胰岛素含量及胰腺β细胞mRNA表达水平。
　　 结果:
　　 1、血糖
　　 0天时Ⅰ、Ⅱ组血糖较Ⅲ、Ⅳ组高，但各组间无显著性差异(P＞0.05);Ⅱ组3天时(16.7±2.6)血糖显著升高，较0天(6.8±0.5)时有统计学差异(P=0.001＜0.05)，以后各时间点仍维持在较高水平，但它们之间无差异;Ⅰ、Ⅲ组各时间点均无差异(P＞0.05);Ⅳ组3天时血糖显著升高，较0天时有统计学差异(P=0.001＜0.05)，4周及以后各时间点均处于较低水平，与0天比无统计学差异(P＞0.05)。
　　 2、血清胰岛素含量(ELISA法)
　　 Ⅰ组血清胰岛素水平各时间点间均无统计学差异（P＞0.05）;与Ⅱ组相比，同时间点胰岛素水平较低，但均无统计学差异(P＞0.05);与Ⅲ组相比，0天时较高，有统计学差异(P=0.001＜0.05)，其余各同时间点胰岛素水平较高，但均无统计学差异(P＞0.05);与Ⅳ组相比，0天时较高，有统计学差异(P=0.044＜0.05)，其余各同时间点胰岛素水平较高，但均无统计学差异（P＞0.05）。
　　 Ⅱ组血清胰岛素水平3天时(30.393±2.038)开始升高，但与0天无统计学差异(P＞0.05)，4周时(31.321±2.467)升高明显，与0天、3天时有差异(P＜0.05），4周、8周、12周、16周、18周血清胰岛素处于较高水平，无显著性差异(P＞0.05)，但呈现先上升后下降的趋势，12周时(37.071±5.537)处于最高水平，28周时(30.854±3.420)血清胰岛素水平降低，与4周、8周、12周、16周、18周有差异(P＜0.05），但与0天、3天无差异(P＞0.05);与Ⅲ组相比，0天时较高，有统计学差异(P=0.001＜0.05)，其余各同时间点胰岛素水平较高，但均无统计学差异(P＞0.05);与Ⅳ组相比，0天时较高，有统计学差异(P=0.024＜0.05)，其余各同时间点胰岛素水平较高，但均无统计学差异(P＞0.05)。
　　 Ⅲ组血清胰岛素水平无明显变化，各个时期均无统计学差异(P＞0.05);与Ⅳ组相比，同时间点胰岛素水平较高，但均无统计学差异(P＞0.05)。
　　 Ⅳ组血清胰岛素水平随时间的推移呈现下降的趋势，但各时间点之间无统计学差异（P＞0.05）。
　　 3、胰腺β细胞mRNA表达水平
　　 Ⅰ组胰腺β细胞mRNA表达水平无明显变化，各时间点间均无统计学差异(P＞0.05);与Ⅱ组相比，同时间点β细胞mRNA表达水平较低，但均无统计学差异(P＞0.05);与Ⅲ组相比，0天时较高，有统计学差异(P=0.015＜0.05)，其余各同时间点β细胞mRNA表达水平较高，但均无统计学差异(P＞0.05);与Ⅳ组相比，0天时较高，有统计学差异(P=0.026＜0.05)，其余各同时间点β细胞mRNA表达水平较高，但均无统计学差异（P＞0.05）。
　　 Ⅱ组β细胞mRNA表达水平3天时开始升高，但与0天无统计学差异(P＞0.05)，4周时升高明显，与0天、3天时有差异(P＜0.05），4周、8周、12周、16周、18周β细胞mRNA表达处于较高水平，无显著性差异(P＞0.05)，但呈现先上升后下降的趋势，12周时处于最高水平，28周时β细胞mRNA表达水平降低，与4周、8周、12周、16周、18周有差异(P＜0.05），但与0天、3天无差异(P＞0.05);与Ⅲ组相比，0天时较高，有统计学差异(P=0.002＜0.05)，其余各同时间点β细胞mRNA表达水平较高，但均无统计学差异(P＞0.05);与Ⅳ组相比，0天时较高，有统计学差异(P=0.001＜0.05)，其余各同时间点β细胞mRNA表达水平较高，但均无统计学差异(P＞0.05)。
　　 Ⅲ组β细胞mRNA表达水平无明显变化，各个时期均无统计学差异(P＞0.05);与Ⅳ组相比，同时间点β细胞mRNA表达水平较高，但均无统计学差异（P＞0.05）。
　　 Ⅳ组β细胞mRNA表达水平随时间的推移呈现下降的趋势，但各时间点之间无统计学差异(P＞0.05)。
　　 结论:
　　 本实验发现，2型糖尿病大鼠模型28周前存在高胰岛素血症，且可能部分与胰岛细胞增殖有关。

目录

声明

摘要

前言

材料与方法

1 实验动物及分组

2 主要仪器与试剂

3 模型的制备

4 观察指标

5 统计分析

结果

1 血糖

2 血清胰岛素含量

3 胰腺β细胞mRNA表达水平

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述

致谢

个人简历