异种冻干骨及其与PRF复合物对骨缺损修复与骨整合作用的实验研究

摘要

目的:通过对兔双侧下颌无牙区牙槽骨行骨极限缺损造模后分别植入富血小板纤维蛋白(Platelet-rich fibrin，PRF)异种冻干骨复合物及异种冻干骨，并同期植入钛螺纹钉，观察并检测缺损区新骨形成及钉周骨整合情况，探讨PRF和异种冻干骨在骨修复及骨整合中的作用机制，为临床应用提供实验参考。
　　方法:
　　1.分组:健康成年新西兰大白兔12只，雌雄不限，随机分为3组，每组4只，分别于术后4、8、12周处死。所有实验动物采取自身对照方法，右侧下颌骨极限缺损区为实验组，植入PRF/异种冻干骨复合物;左侧下颌骨极限缺损区为对照组，植入异种冻干骨。
　　2.异种冻干骨获取及制备:取自人骨组织，经骨髓清洗、深冻、冻干和射线辐照等过程制备。
　　3.PRF的制备:于兔耳中央动脉处快速抽取5ml血置于未添加抗凝剂的采血管中，迅速置于已配平的离心机中，以3000r/min的速度离心10min，停止后取出离心管静置，可见管内血液分为3层:最上层为贫血小板血浆层，中间层为纤维蛋白凝胶层，最底层为红细胞碎片层。弃上清液，分离中间的纤维蛋白凝胶，即为PRF。5ml兔动脉血可制备约7.5×4.0×0.4mm的PRF。
　　4.造模及干预:在每只实验动物的双侧下颌骨门齿远中无牙区牙槽骨各造一约5×4×3mm的缺损，缺损后缘位于颏孔前约4mm处，其下缘与颏孔平齐。分别自缺损区近、远中壁远离缺损区方向以钛螺纹钉配套钻针制备一约直径1.5mm，深3.5mm的种植窝，将钛螺纹钉拧入种植窝，右侧为实验组，缺损区充填PRF/异种冻干骨复合物;左侧为对照组，缺损区仅植入异种冻干骨，逐层缝合，术后正常饮食。
　　5.观察结果:分别于术后4、8、12周以空气栓塞法处死实验动物，沿兔口角做切口，分离出下颌骨，去净其上附丽组织，大体肉眼观察骨极限缺损区愈合修复情况;扭矩实验测试钛螺纹钉-骨界面的结合强度，收集数据进行统计学分析;组织学观察，各标本切片行HE染色后，采集图像，通过多功能真彩色细胞图像分析管理系统分析计算新骨形成面积占视野区面积的百分比，进行新生骨定量分析。
　　结果:
　　1.标本大体肉眼观察结果:实验组及对照组中所植入的钛螺纹钉均无松动脱落，所造骨组织缺损区均逐渐被骨组织覆盖，表面有不同程度凹陷，实验组显示表面形态恢复更为理想。
　　2.术后4、8、12周同一时间点扭矩测试实验组种植体-骨结合强度高于对照组，结果有显著性差异，有统计学意义(P＜0.05)。
　　3.组织学观察术后4、8、12周同一时间点实验组新生骨面积与对照组比较，有统计学意义(P＜0.05)。
　　结论:
　　1.在下颌牙槽骨极限缺损情况下，PRF/异种冻干骨复合物及异种冻干骨均有助于骨缺损修复及钛螺纹钉周骨整合。
　　2.PRF/异种冻干骨复合物有更好的骨传导和骨诱导能力，可以加快骨整合，促进修复进程，较单独使用异种冻干骨效果好。

目录

声明

摘要

前言

材料和方法

1 实验材料

2 实验方法

3 观察指标

4 统计学处理

结果

1 大体观察

2 扭矩测试

3 组织学观察

4 新生骨定量分析

附图

附表

讨论

1 实验动物的选择

2 实验部位及大小的选择

3 PRF耳缘动脉取学的原因

4 建立牙槽骨极限缺损过程中注意事项

5 异种冻干骨的特点

6 PRF在骨缺损及骨整合的应用及作用机理

7 PRF联合异种冻干骨对骨缺损修复及骨整合的作用及探讨

结论

参考文献

综述 冻干骨及富血小板纤维蛋白在骨缺损修复中的研究进展

致谢

个人简历