人食管鳞状细胞癌Fas/FasL蛋白表达与人乳头瘤病毒的关系

摘要

目的:食管癌(Esophageal Carcinoma，EC)是一种常见的消化道恶性肿瘤，在世界范围肿瘤致死疾病中位居第6位。我国处于食管癌高发带上，发病率最高的是河北省与河南省。食管鳞状细胞癌占所有食管癌的90％，其发病原因尚未阐明，营养不良、吸烟、饮酒以及过热饮食等环境因素都与其密切相关。人乳头瘤病毒（Human Papillomavirus，HPV）是一种双链环形DNA病毒，可以感染上皮组织，包括口腔食管组织及肛门生殖器官。最近有相关报道称，HPV感染有可能是食管鳞状细胞癌的诱因之一。现已被证明HPV会抑制宫颈鳞状细胞Fas/FasL凋亡途径，诱发癌变，而其在食管鳞状细胞癌中的作用尚未明确。为进一步明确HPV在食管鳞状细胞癌发生发展中的作用，本研究首先要明确我省食管鳞状细胞癌中HPV的感染率以及Fas/FasL蛋白的表达情况，分析HPV感染与Fas/FasL蛋白表达的关系，希望从细胞凋亡方面揭示食管鳞状细胞癌与HPV感染的关系。
　　方法:
　　1、标本收集
　　收集河北医科大学第二医院2009年1月至2014年5月间符合条件的食管鳞状细胞癌（原发性鳞状细胞癌，手术前未经过放化疗）的石蜡组织，共150例。收集临床病理资料，包括年龄，性别，淋巴结转移情况和癌组织分化程度。
　　2、检测病毒DNA
　　将石蜡组织切成薄片，使用石蜡组织DNA提取盒提取组织DNA。
　　以HPV L1基因MY09/MY11为引物，用PCR方法检测各实验组与阳性对照组中HPV L1基因的存在。使用beita-actin作为内参，使用三蒸水代替引物完成PCR反应做为阴性对照，使用确诊HPV阳性的宫颈癌石蜡组织提取的DNA作为阳性对照。
　　3、检测Fas/FasL蛋白表达
　　应用免疫组化SP法检测食管鳞状细胞癌及癌旁正常组织中Fas/FasL蛋白表达情况，Fas/FasL蛋白阳性反应主要定位于细胞膜，少量位于细胞浆。
　　4、统计分析所有数据采用SPSS19.0软件，应用X2检验对数据进行统计学处理及相关分析。
　　结果:
　　1、食管鳞状细胞癌HPV检测结果
　　PCR结果显示，150例标本中51例HPV检测结果阳性，感染率34.0％。
　　2、食管鳞状细胞癌Fas/FasL蛋白表达结果
　　免疫组化结果显示，食管鳞状细胞癌组织Fas蛋白阳性表达率为59.3％，明显低于癌旁组织94.7％(P＜0.05)。食管鳞状细胞癌组织FasL蛋白阳性表达率为76.0％，明显高于癌旁组织44.7％(P＜0.05)。
　　3、食管鳞状细胞癌HPV感染与Fas/FasL蛋白表达的关系
　　HPV阳性的癌组织Fas蛋白阳性表达率为25.5％，明显低于HPV阴性的癌组织76.8％; HPV阳性的癌旁组织Fas蛋白阳性表达率为86.3％，也低于HPV阴性的癌旁组织99.0％(P＜0.05)。
　　HPV阳性的癌组织FasL蛋白阳性表达率为56.9％，明显低于HPV阴性的癌组织85.9％(P＜0.05);HPV阳性的癌旁组织FasL蛋白阳性表达率为41.2％与HPV阴性的癌旁组织46.5％之间无统计学差异(P＞0.05)。
　　4、HPV与临床病理特征的关系
　　HPV阳性癌组织低分化鳞癌占43.1％，明显高于HPV阴性的癌组织22.2％(P＜0.05);HPV阳性的癌组织高中分化鳞癌占46.9％，明显低于HPV阴性癌组织77.8％(P＜0.05);HPV感染与患者性别，年龄以及有无淋巴结转移无相关关系(P＞0.05)。
　　5、Fas/FasL蛋白表达与临床病理特征的关系
　　低分化癌组织Fas蛋白阳性表达率为43.2％，明显低于高中分化癌组织66.0％(P＜0.05);Fas蛋白表达与患者性别，年龄以及有无淋巴结转移无相关关系(P＞0.05)。
　　低分化癌组织FasL蛋白阳性表达率为61.4％，明显低于高中分化癌组织82.1％;62岁以上（包括62岁）患者癌组织FasL蛋白阳性表达率为65.8％，明显低于62岁以下患者87.3％(P＜0.05);FasL蛋白表达与患者性别，有无淋巴结转移无相关关系（P＞0.05）。
　　6、HPV，Fas/FasL蛋白表达与临床病理特征的关系
　　HPV阳性的癌组织中:62岁以上（包括62岁）患者Fas蛋白阳性表达率为13.8％，明显低于62岁以下患者40.9％;62岁以上患者（包括62岁）FasL蛋白阳性表达率为41.4％，明显低于62岁以下患者77.3％(P＜0.05)。
　　结论:
　　1、本组食管鳞状细胞癌HPV的感染率为34.0％，HPV阳性的癌组织低分化鳞癌增多，提示HPV与肿瘤分化存在相关关系。
　　2、食管鳞状细胞癌组织中，Fas蛋白表达降低，而FasL蛋白表达升高，提示Fas/FasL蛋白表达异常参与了食管鳞状细胞癌的发生。
　　3、HPV感染可进一步干扰Fas/FasL蛋白表达，提示HPV通过Fas/FasL凋亡途径，在食管鳞状细胞癌的发生中发挥一定作用。
　　4、HPV对Fas/FasL蛋白的影响在年老患者更显著，提示HPV感染对不同人群的影响并不完全相同，可能存在敏感人群。

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材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述 人乳头瘤病毒调节宿主细胞凋亡通路的机制

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