海兰灰蛋鸡育成期小肠SGLT1、GLUT2 mRNA表达发育变化及其与生产性能的关系

摘要

本试验通过测定海兰灰蛋鸡育成期小肠钠/葡萄糖转运载体1(SGLT1)、葡萄糖转运载体2(GLUT2) mRNA表达量，同时统计其生产性能，研究海兰灰蛋鸡育成期小肠SGLT1、GLUT2 mRNA表达发育变化及其与生产性能的关系。试验选取57日龄遗传背景相同、健康的海兰灰蛋鸡150只，饲养10周，并分别于57、71、85、99、113、127d每次屠宰6只，取小肠黏膜作为样品，采用荧光定量PCR技术进行检测，并于每周末测定生产性能，试验结果如下:
　　 1.海兰灰蛋鸡小肠SGLT1 mRNA的相对表达量在57d为3.26×10-5，71d降低，在71d～99d呈升高趋势，99d为最大值10.37×10-5，99d～127d呈下降趋势。71d SGLT1mRNA的相对表达量较57d显著降低了59.51％(P＜0.05)，85d较71d显著升高了75％(P＜0.05)，99d较85d显著升高了348.92％(P＜0.05)，113d较99d显著降低了59.50％(P＜0.05)，127d较113d显著降低了21.67％(P＜0.05)，且与57d差异不显著(P＞0.05)。
　　 2.海兰灰蛋鸡育成期小肠GLUT2 mRNA的相对表达量在57d为2.79×10-5，57d～85d呈下降趋势，99d升高，且为最大值9.80×10-5，99d～127d呈下降趋势。71d GLUT2 mRNA的相对表达量较57d显著降低了19.71％(P＜0.05)，85d较71d显著降低了42.41％(P＜0.05)，99d较85d显著升高了659.69％(P＜0.05)，113d较99d显著降低了59.90％(P＜0.05)，127d较113d显著降低了38.93％(P＜0.05)，且与71d差异不显著(P＞0.05)。
　　 3.从57d到71d，SGLT1、GLUT2 mRNA的相对表达量均显著下降(P＜0.05)，平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)及料重比升高，但差异不显著(P＞0.05);从71d到85d，SGLT1 mRNA的相对表达量显著上升(P＜0.05)，GLUT2 mRNA的相对表达量显著下降(P＜0.05)，ADFI、ADG及料重比升高，但差异不显著(P＞0.05);从85d到99d，SGLT1、GLUT2 mRNA的相对表达量显著上升(P＜0.05)，ADFI和料重比显著上升(P＜0.05)，ADG显著下降(P＜0.05);从99d到127d，SGLT1、GLUT2 mRNA的相对表达量均显著下降(P＜0.05)，ADFI呈上升趋势，但差异不显著(P＞0.05)，料重比显著上升(P＜0.05)，ADG显著下降(P＜0.05)。
　　 试验研究结果表明，海兰灰蛋鸡小肠SGLT1、GLUT2 mRNA有着不同的表达发育模式，但均与生产性能有一定的关系。其中，在57～85d，SGLT1、GLUT2mRNA的表达发育变化与生产性能的表现一致;在85～99d，SGLT1、GLUT2mRNA的表达发育变化与ADFI和料重比的变化一致，与ADG的变化相反;在99～127d，SGLT1、GLUT2 mRNA的表达发育变化与ADG变化相同，与ADFI和料重比变化相反。

目录

声明

摘要

1 引言

1．1 家禽对碳水化合物消化吸收特点

1．1．1 淀粉和非淀粉多糖的消化

1．1．2 单糖的吸收

1．2 肠道葡萄糖吸收转运载体的研究进展

1．2．1 葡萄糖转运载体的分类

1．2．2 肠道葡萄糖的吸收机制

1．2．3 葡萄糖转运载体在肠道的表达分布

1．2．4 影响转运葡萄糖载体表达的因素

1．3 实时荧光定量PCR技术简介

1．3．1 实时荧光定量PCR原理

1．3．2 实时荧光定量PCR技术检测方法

1．3．3 实时荧光定量PCR的重要参数

1．3．4 实时荧光定量PCR的定量方法

1．4 研究目的及意义

2 材料与方法

2．1 试验材料

2．1．1 试验时间与试验地点

2．1．2 试验动物

2．1．3 试验设计与日粮组成

2．1．4 试验动物的饲养与管理

2．1．5 样品的采集与制备

2．1．6 主要试剂

2．1．7 主要仪器

2．1．8 溶液的配制

2．2 试验指标及测定方法

2．2．1 小肠SGLT1、GLUT2 mRNA表达量的测定

2．2．2 生产性能指标的测定

2．3 计算及统计方法

3 结果与分析

3．1 海兰灰蛋鸡小肠SGLT1、GLUT2基因实时荧光定量PCR条件的建立

3．1．1 小肠粘膜组织总RNA的提取效果

3．1．2 SGLT1、GLUT2及β-actin基因RT-PCR的扩增结果

3．1．3 SGLT1、GLUT2及β-actin基因克隆质粒测序结果

3．1．4 SGLT1、GLUT2及β-actin基因的实时荧光定量曲线图

3．2 海兰灰蛋鸡育成期小肠SGLT1、GLUT2 mRNA相对表达量的变化

3．2．1 海兰灰蛋鸡育成期小肠SGLT1mRNA不同日龄相对表达量

3．2．2 海兰灰蛋鸡育成期小肠GLUT2 mRNA不同日龄相对表达量

3．2．3 海兰灰蛋鸡育成期小肠SGLT1、GLUT2 mRNA相对表达量的变化

3．3 海兰灰蛋鸡育成期生产性能测定结果

3．4 海兰灰蛋鸡育成期小肠SGLT1、GLUT2 mRNA的表达量与生产性能各指标的动态变化

4 讨论

4．1 实时荧光定量PCR技术检测SGLT14、GLUT2mRNA试验成功的条件

4．1．1 总RNA的提取质量

4．1．2 引物的设计

4．1．3 标准曲线的建立

4．2 海兰灰蛋鸡育成期SGLT1、GLUT2 mRNA的表达发育变化

4．2．1 海兰灰蛋鸡育成期SGLT1 mRNA表达发育变化

4．2．2 海兰灰蛋鸡育成期GLUT2 mRNA表达发育变化

4．2．3 海兰灰蛋鸡育成期SGLT1、GLUT2 mRNA表达发育变化与生产性能的关系

5 结论

参考文献

在读期间发表的论文

作者简介

致谢