昆虫病原线虫胶囊剂及粉剂的研制

摘要

昆虫病原线虫(Entomopathogenic nematodes，EPN)广泛存在于土壤中，以感染期虫态(infective juvenile，IJs)侵染寄主昆虫，对防治一些隐蔽性的地下害虫及钻蛀类害虫表现出巨大的潜力。但是，作为自然界的一种生物活体，很多不利因素限制其推广应用。为了延长保存期限、提高防治效果，研发合适的昆虫病原线虫商品化剂型显得尤为重要。本实验通过研究2种昆虫病原线虫剂型——胶囊制剂与粉剂，寻找更好地保存昆虫病原线虫的最佳方法。主要研究结果如下:
　　1.昆虫病原线虫胶囊剂型的研制:以线虫Steinernema carpocapsae HB310为研究材料，在线虫悬浮液中添加18％甘油、0.075％甲醛、1％海藻酸钠、0.2％黄原胶和0.5％山梨酸钾形成混合液，将该混合液滴在0.5％氯化钙溶液中，最终形成昆虫病原线虫胶囊。胶囊为直径4mm的圆形颗粒，筛选出0.3％柠檬酸钠溶液作为线虫胶囊的溶解剂;在16℃及密封条件下保存4个月后线虫存活率仍保持为86.48％，线虫对大蜡螟致死率为98.61％。实验结果表明该胶囊剂配方不仅适合昆虫病原线虫的长时间保存，线虫还保持较高的存活率和致病力。
　　同时，对于昆虫病原线虫胶囊剂的使用方法进行了改进:进一步通过添加不同成分、改良胶囊配方提高4龄小地老虎幼虫对线虫胶囊的取食量，结果显示在24h内小地老虎取食完成添加9％葡萄糖成分的胶囊。盆栽法进一步比较了线虫胶囊溶解液与直接撒施线虫胶囊两种方法对试虫的致病力，结果显示线虫悬浮液、原配方胶囊、9％葡萄糖胶囊对玉米苗的保苗效果分别是64.81％、14.81％和38.89％，对小地老虎的防治效果分别是95.24％、57.14％和90.48％。因此，实验结果说明线虫胶囊可以直接撒施使用，防治地下害虫小地老虎。
　　2.昆虫病原线虫粉剂的研制:以线虫S.carpocapsae HB310为供试材料，对基质、保水剂、保护剂进行筛选，测定了不同温度下基质对线虫存活率的影响，最终确定昆虫病原线虫粉剂的配方是:30％白炭黑、0.5％羟丙基甲基纤维素、0.5％黄原胶、18％甘油、0.1％甲醛、0.5％山梨酸钾。在10℃及密封条件下线虫粉剂保存4个月后线虫存活率为78.24％，线虫对大蜡螟致死率为95.83％。并采用盆栽法测定其对4龄小地老虎的致病力，结果显示保苗效果及防治效果分别是43.33％和80.95％。实验结果说明本研究所筛选的昆虫病原线虫粉剂可用于较长时间保存线虫和防治害虫。

目录

声明

摘要

1．1．1昆虫病原线虫及共生菌应用概况

1．1．2昆虫病原线虫的分类与致病机理

1．1．3昆虫病原线虫对寄主昆虫的侵染习性

1．2昆虫病原线虫的贮存及商品剂型

1．2．1昆虫病原线虫的贮存及影响因素

1．2．2昆虫病原线虫的培养技术与剂型研制

1．3本论文的目的及意义

2．1．1供试寄主昆虫

2．1．2供试线虫

2．1．3实验药品

2．1．4实验仪器

2．2实验方法

2．2．1昆虫病原线虫胶囊配方及制作工艺的优化

2．2．2线虫析出及胶囊溶解剂的筛选

2．2．3线虫胶囊长时间贮存后线虫活性测定

2．2．4不同葡萄糖含量的胶囊的筛选

2．2．5小地老虎对不同配方胶囊及玉米叶片的取食选择性测定(平皿法)

2．2．6昆虫病原线虫胶囊对小地老虎的致病力的测定(盆栽法)

2．2．7昆虫病原线虫粉剂基质的筛选

2．2．8不同温度条件对昆虫病原线虫粉剂最佳基质的影响

2．2．9昆虫病原线虫保水剂及紫外保护剂的筛选

2．2．10昆虫病原线虫粉剂成品的制备与生物测定

2．2．11昆虫病原线虫粉剂对小地老虎致病力的测定(盆栽法)

2．2．12数据分析

3结果分析

3．1昆虫病原线虫胶囊的研究与应用

3．1．1昆虫病原线虫胶囊的成品制备

3．1．2昆虫病原线虫胶囊制作工艺的优化

3．1．3昆虫病原线虫胶囊溶解剂的筛选

3．1．4昆虫病原线虫胶囊贮存时间对线虫存活率的影响

3．1．5小地老虎对不同配方胶囊取食趋性的测定(平皿法)

3．1．6线虫胶囊对小地老虎致病力的测定(盆栽法)

3．2昆虫病原线虫胶囊粉剂的研究与应用

3．2．1昆虫病原线虫粉剂基质的筛选

3．2．2不同温度条件下基质内线虫存活率的检测

3．2．3保水剂及紫外保护剂的筛选

3．2．4昆虫病原线虫粉剂存活率、致死率及侵染力的测定

3．2．5昆虫病原线虫粉剂对小地老虎致病力的测定(盆栽法)

4讨论

4．1昆虫病原线虫胶囊的制备工艺

4．2昆虫病原线虫胶囊制剂的施用方法改进

4．3昆虫病原线虫粉剂的制备与研究

5结论

参考文献

作者简介

致谢