Nisin-中药复合高效环保型饵料添加剂的研究

摘要

近年来，随着我国规模化、集约化水产养殖的逐渐普及，海水养殖病害日益严重，往往给养殖业带来致命的打击。且“入口”水产品的安全性，常常是人们首先关心的问题。某些抗生素药物、生物活性物质在水生动物机体中的残留，往往直接影响着人类的健康。要从根本上解决这一问题，还须树立环境保护观念，大力研制、开发和推广使用功能强、价格低、性能优、无毒副作用、利于环保的绿色水产饲料添加剂。本课题旨在研制一种新型天然饵料添加剂，此添加剂以Nisin为主，加入了增加免疫力的抗病毒的中药。为此，我们进行了一系列试验：对革兰氏阴、阳性菌的抑制试验；毒性试验；对饵料防腐保鲜的研究，以及投放试验，并对以柠檬酸为酸化剂做了初步的研究。结果如下： 1.Nisin对藤黄微球菌、金黄色葡萄球菌等G+菌有显著的抑制作用；副溶血弧菌虽为G-菌，Nisin对其也有很强的抑菌效果；Nisin对大肠杆菌、嗜水气单胞菌、荧光假单胞菌等G-菌没有抑菌作用。 2.柠檬酸对副溶血弧菌、嗜水气单胞菌、荧光假单胞菌有抑菌作用。Nisin溶于柠檬酸溶液后明显提高了这三种菌分别对柠檬酸、Nisin的敏感性。Nisin与中药复合液一起对G+菌如藤黄微球菌、金黄色葡萄球菌，以及对G-菌如副溶血弧菌、嗜水气单胞菌、荧光假单胞菌、大肠杆菌有抑菌作用。中药浓度不变，试验所用菌随着Nisin浓度的增大而对Nisin和中药复合液的敏感性增强。 3.Nisin与中药复合液一起饲喂鲫鱼试验。饲料中添加Nisin与中药复方组比对照组增重率高15.2％，表现出明显的增重作用。对鲫鱼进行解剖，观察肝胰脏。发现无异样，可见Nisin与中药复合液是安全无毒害的。 4.通过对饵料微生物、pH值以及感官质量的测定来考查Nisin、柠檬酸和中药复合液对饵料防腐保鲜的应用效果。Nisin、柠檬酸、中药单独或联合应用时，基于对微生物不同程度的抑制作用，而进一步影响pH和感官质量。Nisin、柠檬酸和中药配合使用效果最好，添加量分别为0.02％、0.15％、1％。 5.Nisin和中药复合液以1g：25mL的比例进行混合，配合使用饲喂罗氏沼虾，添加量为1％。添加剂饲喂罗氏沼虾的结果表明，添加剂具有良好的促生长，提高虾体免疫力、抗病能力，耐缺氧的效果，可以增产。与对照组比较，在同等养殖虾条件下，可提高生长速度15～40％左右，节省饵料15％左右，提高成活率26％左右。 本课题将Nisin与中药合用，取长补短，大大提高了抑菌效果。并在添加剂中加入酸化剂柠檬酸，扩大了Nisin的抑菌效果和范围。

目录

文摘

英文文摘

第一章文献综述

§1-1引言

§1-2 Nisin的概况

1-2-1 Nisin的结构

1-2-2 Nisin的抑菌性能及作用机理

1-2-3联合抑菌作用

1-2-4 Nisin的溶解度和稳定性

1-2-5 Nisin的安全性

1-2-6 Nisin的国内外研究进展

1-2-7前景展望

§1-3柠檬酸的概况

1-3-1柠檬酸简介

1-3-2柠檬酸在水产养殖饵料中的作用

1-3-3柠檬酸应用中有待解决的问题及应用前景

§1-4中药的概况

1-4-1中草药的化学成分

1-4-2中草药添加剂的主要作用

1-4-3中草药添加剂使用和研究中存在的问题

1-4-4中草药添加剂的发展前景

§1-5水产饲料添加剂

§1-6本论文研究内容及意义

第二章Nisin的抑菌作用

§2-1引言

§2-2材料与方法

2-2-1菌株

2-2-2培养基及培养条件

2-2-3试剂

2-2-4主要仪器设备

2-2-5实验内容及方法

§2-3结果与分析

2-3-1 Nisin浓度与抑菌作用的关系

2-3-2 Nisin抑菌试验

§2-4小结

第三章Nisin、柠檬酸、中药复合液的联合作用

§3-1引言

§3-2材料与方法

3-2-1菌株

3-2-2培养基及培养条件

3-2-3试剂

3-2-4主要仪器设备

3-2-5实验内容及方法

§3-3结果与分析

3-3-1柠檬酸浓度与抑菌作用的关系

3-3-2 Nisin与柠檬酸复合溶液的抑菌作用

3-3-3 Nisin与中药复合药液对副溶血弧菌的抑菌作用

3-3-4 Nisin与中药复合液对嗜水气单胞菌的抑菌作用

3-3-5 Nisin与中药复合药液对荧光假单胞菌的抑菌作用

3-3-6 Nisin与中药复合液的抑菌谱

§3-4讨论

§3-5小结

第四章Nisin-中药添加剂实验室饲喂鲫鱼实验

§4-1引言

§4-2材料与方法

4-2-1试验鱼

4-2-2 Nisin与中药复合添加剂配方

4-2-3饲料

4-2-4方法

4-2-5毒性试验

§4-3结果与分析

4-3-1摄食情况

4-3-2生长情况

4-3-3毒性检测

4-3-4分析

§4-4 小结

第五章Nisin-中药添加剂在饵料保鲜中的应用

§5-1引言

§5-2材料与方法

5-2-1材料

5-2-2主要仪器设备

5-2-3实验内容及方法

§5-3结果与分析

5-3-1不同处理组对饵料微生物的影响

5-3-2不同处理组对样品pH值的影响

5-3-3不同处理组对饵料感官质量的影响

§5-4讨论

5-4-1不同处理组对饵料微生物的影响

5-4-2不同处理组对样品pH值的影响

5-4-3不同处理组对饵料感官质量的影响

§5-5小结

第六章Nisin-中药添加剂池塘饲喂小试

§6-1引言

§6-2材料与方法

6-2-1试验虾

6-2-2 Nisin与中药复合添加剂配方

6-2-3方法

§6-3结果与分析

6-3-1结果

6-3-2分析

§6-4讨论

§6-5小结

第七章结论

§7-1结论

§7-2展望及对今后工作的建议

参考文献

附录A

致谢

攻读学位期间所取得的相关科研成果