转酮醇酶基因在植物感应AHLs中的功能研究

摘要

革兰氏阴性菌分泌信号分子N-酰基高丝氨酸内酯（简称AHLs）。它可以自由进出细菌细胞，细菌通过感知信号分子的浓度来监测自身群体密度，使细菌做出相应的反应来进行调控。而植物也可以感知细菌的AH Ls信号分子，并产生包括免疫反应在内的应激反应来抵抗病原菌的侵染。
　　本论文通过3H标记的AHLs为探针对拟南芥cDNA文库进行筛选，发现转酮醇酶基因（TK）可能与AHLs相互作用。筛选出基因后就通过两方面来研究在植物感应AHLs中的功能，一方面是构建表达菌株，通过体外表达的蛋白来研究；另一方面是通过突变体与野生型的比较来研究它在植物AHLs中的作用。
　　通过构建表达均菌株，从而得到体外表达的蛋白，通过酶联免疫法（ELISA）证实了转酮醇酶基因的蛋白与信号分子Bio-3OC6-HSL有特异性结合。在植物中，得到tk的突变体，对其进行根长实验和Real Time PCR检测，都证实了TK基因在植物感受信号分子的途径中的重要作用。对TK基因的抗逆性进行研究中，结果表明它在植物抗盐中也起重要作用，而在AH Ls和氯化钠共同影响TK的表达的实验表明，TK可以同时参与调控植物感知AHLs和植物的抗逆性。
　　通过比较TK的突变体植株的MAPK的蛋白表达，蛋白磷酸化，以及基因的表达与野生型里MAPK的蛋白表达，蛋白磷酸化，以及基因的表达的异同，确定了TK在感知信号分子的过程中与MAPK途径有关，初步了解TK途径影响植物感受信号分子的机理。

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符号说明

第一章 绪论

1.1 AHLs对植物的影响

1. 2 拟南芥根系统研究进展

1.3 植物的防卫反应

1. 4 课题的意义

第二章 表达菌株的构建以及相关蛋白的研究

2. 1 实验材料

2. 2 实验方法

2. 3 实验结果

2 .4 讨论

第三章 拟南芥中TK基因与AHLs作用的研究

3. 1 实验材料

3. 2 实验方法

3. 3 实验结果

3. 4讨论

第四章 结论

第五章 展望

参考文献

附录

致谢