莠去津对斑马鱼生殖发育影响的研究

摘要

莠去津（Atrazine）是一类常用的禾本科杂草和阔叶草类除草剂，具有长期广泛的环境毒性。莠去津具有潜在的致癌性，由它们所造成的水体、土壤等环境污染已经越来越引起人们的关注。本文以斑马鱼为对象，通过对其下丘脑、垂体、性腺等组织形态学观察及组织液中性激素含量的分析，结合胚胎和幼鱼的急性毒性实验，研究了不同浓度莠去津处理对斑马鱼生殖发育的影响。结果如下：
　　 1.斑马鱼胚胎和幼鱼对莠去津的毒性作用均很敏感，随着莠去津浓度的增加，斑马鱼胚胎孵化率降低，畸形率增加，幼鱼的致死率增大。当莠去津浓度高于30mg/L时，斑马鱼胚胎致死率和畸形率增加，50 mg/L时胚胎出现全致死效应。初孵仔鱼对莠去津的毒性也很敏感，24 h半致死浓度（LC50）为36.25 mg/L，48 h半致死浓度（LC50）为22.89mg/L，当莠去津浓度为50 mg/L时，48 h产生全致死效应。
　　 2.莠去津能明显抑制斑马鱼性腺发育，性腺的发育程度与莠去津浓度呈负相关性。即莠去津浓度越大，生殖细胞的成熟度越低，性腺发育越迟缓，且暴露时间越长，此现象越明显。雌激素效应与莠去津浓度呈正相关，随莠去津浓度升高和暴露时间的延长，斑马鱼性腺切片中卵巢的数量增加。但该结论在斑马鱼下丘脑和垂体的组织学上表现并不明显。
　　 3.莠去津对斑马鱼体内激素平衡有一定的干扰作用。随莠去津浓度的增加，斑马鱼组织液中的E2含量上升。对照组E2含量为7.84 pmol/L，莠去津10-4和10-3 mg/L处理组组织液E2浓度略有增长，分别为9.54，14.90 pmol/L。当莠去津浓度为10-2、10-1和1 mg/L，时，斑马鱼组织液E2浓度升高超过100％，其中1 mg/L时，组织液E2浓度达到41.44pmol/L。而处理组斑马鱼组织液中T含量与对照组（0.064 ng/ml）相比，都有不同程度增高，但各浓度处理组之间并无显著梯度变化，都在0.1-0.15 ng/ml范围内。E2/T也呈现与E2相同的趋势，当莠去津浓度增大到1 mg/L时，E2/T值升高显著。该结果表明，1 mg/L浓度可能是斑马鱼对莠去津的效应浓度。
　　 综上所述，莠去津作为内分泌干扰物，能抑制斑马鱼性腺发育，影响体内激素平衡，并且对斑马鱼胚胎和幼鱼产生致死和致畸等效应。因此，莠去津对斑马鱼的生殖和发育都有明显干扰作用，应谨慎使用。

目录

文摘

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论文说明：缩略词

声明

第一章 绪论

1.1环境激素的概况

1.1.1环境激素的概念及种类

1.1.2环境激素对动物的危害

1.1.3环境激素对人类的危害

1.2莠去津的研究现状

1.2.1莠去津的理化性质及简介

1.2.2莠去津的主要应用和环境污染效应

1.2.3莠去津对生物的危害

1.2.4莠去津的生物修复和降解

1.3重要的模式生物

1.3.1斑马鱼作为模式生物的优势

1.3.2斑马鱼应用于各领域的研究进展

1.4鱼类下丘脑—垂体—性腺的关系

1.5研究的目的和意义

第二章 莠去津对斑马鱼胚胎发育及幼鱼成活的影响

2.1实验材料

2.1.1斑马鱼亲鱼饲养与日常维护

2.1.2斑马鱼的繁殖和受精卵的培养与孵化

2.2实验方法

2.2.1仪器与试剂

2.2.2莠去津处理液的配置

2.2.3莠去津处理斑马鱼胚胎

2.2.4莠去津处理斑马鱼幼鱼

2.2.5实验数据处理

2.3实验结果

2.3.1莠去津对斑马鱼胚胎的毒性

2.3.2莠去津对斑马鱼幼鱼的毒性

2.4讨论

第三章 莠去津对斑马鱼下丘脑—垂体—性腺轴各器官组织结构的影响

3.1实验材料与方法

3.1.1仪器与试剂

3.1.2莠去津处理实验鱼

3.1.3组织切片的制备

3.2实验结果

3.2.1莠去津对斑马鱼下丘脑及垂体显微结构的影响

3.2.2莠去津对斑马鱼性腺显微结构的影响

3.3讨论

3.3.1莠去津对斑马鱼下丘脑和垂体的影响

3.3.2莠去津对斑马鱼性腺发育的影响

第四章 莠去津对斑马鱼组织液性激素含量的影响

4.1实验材料与方法

4.1.1仪器与试剂

4.1.2组织液的提取

4.1.3激素的测定

4.1.4数据处理

4.2实验结果

4.2.1莠去津对斑马鱼E2含量的影响

4.2.2莠去津对斑马鱼T含量的影响

4.2.3莠去津对斑马鱼组织液E2/T变化的影响

4.3讨论

第五章 结论与展望

5.1结论

5.2展望

参考文献

图版说明

图版

致谢

附录