蜂病康合剂提高蜜蜂耐力作用及蜜蜂快速衰老模型的建立

摘要

目的：拟开发一种能有效治疗蜜蜂常见感染性疾病的纯中药合剂，从而解决目前在生产蜂产品的过程中滥用化学药物造成的药物残留问题，以及随之而来的食品安全、出口受限、环境毒害等问题；初步探讨把蜜蜂作为一种新的实验动物的可行性，建立一种蜜蜂快速衰老动物模型。 方法：通过制备工艺优选，确定合剂的制备工艺；用薄层色谱法检识蜂病康合剂中的靛玉红和黄芩苷，并用HPLC法测定合剂中黄芩苷的含量，以便确定质量标准。通过蜂病康合剂对正常意大利蜜蜂常压耐缺氧、耐高温、耐低温能力的研究，观察此药物提高蜜蜂耐受不良环境的能力。通过适当高温、缺氧结合震动环境，建立蜜蜂快速衰老动物模型，并通过观察蜜蜂的外观变化及测量蜜蜂整体匀浆中总SOD活力和GSH-PX活力的变化情况，结合病理切片确定合适的造模时间。根据上述造模方法的筛选进行下一步实验：预先给药7天后，分别给蜂病康合剂大、小剂量组、阳性对照组、空白对照组、模型对照组的蜜蜂进行造模，之后分别测定其整体匀浆中的SOD、MDA、GSH-PX，进行统计分析，并观察各组蜜蜂肠、脑的组织病理切片，分析实验结果。 结果：通过药学研究，我们已经成功制备出一种合剂剂型，确定了质量标准，已经试生产出了少量样品。通过蜂病康合剂对正常意大利蜜蜂常压耐缺氧、耐高温、耐低温能力的研究，发现蜂病康合剂使用后能够明显增加蜜蜂在常压缺氧环境中的耐受时间、提高在高温和低温环境中的耐受能力，并能减少冻僵后复苏时间。通过建立蜜蜂快速衰老模型，并对造模时间进行筛选，发现在造模进行四小时后，蜜蜂体内的SOD、GSH-PX与正常组比较下降明显，病理组织学观察也显示随着造模时间的增加，蜜蜂脑组织和肠组织变性加重，说明造模成功。药效实验中发现给予大、小剂量的合剂均能明显升高蜜蜂体内的SOD活力，大剂量能明显升高蜜蜂体内的GSH-PX活力。病理学观察也显示给药组能不同程度的对抗脑组织细胞和肠组织细胞的这种变性。 结论：蜂病康合剂的制备工艺合理，可以进行试生产，并进一步开发；此药给正常蜜蜂饲喂后能够显著提高其对抗不良生活环境的能力，提高对不良气候的耐受性；建立蜜蜂快速衰老模型成功，同时说明此药物能对抗蜜蜂的这种快速衰老，为以后的进一步开发奠定基础。

目录

声明

摘要

前 言

实验1蜂病康合剂的药学研究

实验2蜂病康合剂对正常蜜蜂常压耐缺氧、耐高温、耐低温的影响

材料与方法

结果

实验3蜜蜂快速衰老动物模型的研究

材料与方法

结果

实验4蜂病康合剂对蜜蜂快速衰老动物模型的影响

材料与方法

结果

讨论

结论

致谢

参考文献

附录