桔梗饮片炮制工艺及质量标准研究

摘要

目的：本课题为河南省重大科技攻关课题“中药饮片加工与炮制规范化研究(编号：0522030200)”的子课题，是“桔梗饮片加工炮制规范化研究”的一部分。桔梗药材来源为桔梗科植物桔梗Platycodon grandiflorum (Jacq.)A.DC．的干燥根。主要是通过对桔梗的临床常用饮片规格、桔梗的炮制工艺和饮片质量标准进行规范化研究，规范桔梗饮片炮制工艺，建立饮片质量标准，控制饮片质量，保证中医临床用药安全有效。 方法：在查阅古文献和现代文献的基础上，总结前人炮制经验，撰写文献综述。 以桔梗总皂苷和桔梗皂苷D为指标，采用药典法测定桔梗总皂苷，RP—HPLC法测定桔梗皂苷D，对桔梗几种不同炮制品：原药材、生品、炒黄品、蜜炙品进行比较研究。 以切片厚度、闷润时间、烘干温度为因素，选取不同水平，以桔梗总皂苷含量为考察指标，通过正交实验优选桔梗切制最佳工艺。再以蜂蜜(中蜜)用量，蜂蜜稀释用水量、烘干温度、烘制时间等主要影响因素，以桔梗总皂苷和桔梗皂苷D为检测指标，通过正交试验设计，采用综合加权法对数据进行处理，优选出蜜炙桔梗最佳工艺。 在上述研究的基础上，采集十批样品，进行中试生产，验证工艺的稳定性和可行性。对十批中试样品的桔梗饮片、蜜炙桔梗饮片，进行理化鉴别、显微鉴别实验：对水分、灰分、酸不溶灰分、水溶性浸出物含量、醇溶性浸出物含量进行了测定，并规定了其限度标准；药典法测定了桔梗、蜜炙桔梗饮片的桔梗总皂苷含量，并进行炮制前后的比较。在上述研究的基础上，按照有关要求，分别制定了含量限度，初步建立了桔梗、蜜炙桔梗饮片质量标准(草案)。 采用SHIMADZU LC-2010AT高效液相色谱仪，Agilent HP-C18(4.6mm×250mm)高效液相色谱柱，检测波长：210nm，流动相：甲醇：0.1％磷酸水0.00～10 min(10：90)，10.01～20 min(15：85)，20.01～30 min(15：85)，30.01～35 min(20：80)，35.01～45min(25：75)，45.01～55 min(25：75)，55.01～60 min(29.1：70.2)，60.01～80 min(29.1：70.2)，80.01～85 min(35：65)，85.01～120min(40：60)为梯度洗脱，流速：1.0ml/min，柱温：40℃。分别建立桔梗，蜜炙桔梗饮片高效液相指纹图谱。通过指纹图谱Chromafinger° 2005 beta 0.1处理软件对桔梗、蜜炙桔梗饮片指纹图谱进行相似度分析。 结果：撰写出“桔梗饮片炮制历史沿革及现代研究概况”一篇文献综述。对桔梗几种不同炮制品：原药材、生品、炒黄品、蜜炙品进行了比较研究的结果表明不同炮制方法对桔梗总皂苷和桔梗皂苷D含量有一定影响，桔梗不同炮制品总皂苷含量比较结果由低到高为：生品<原药材<炒黄品<蜜炙品；不同炮制品皂苷D含量高低如下：原药材>蜜炙品>炒黄品>生品。 通过正交实验优选桔梗切制最佳工艺为闷润2h，切片厚度为1mm，60℃烘3.5h。通过正交试验设计，采用综合加权法对数据进行处理，优选出蜜炙桔梗最佳工艺为15％的炼蜜，用炼蜜1/3量的水稀释后拌匀，80℃烘1小时。桔梗、蜜炙桔梗饮片质量标准结果，可以考虑桔梗饮片水分不得过10.0％，蜜炙桔梗饮片水分不得过9.0％。桔梗饮片灰分不得过5.0％，酸不溶性灰分不得过1.0％。蜜炙桔梗饮片灰分不得过5.0％，酸不溶性灰分不得过1.0％。桔梗饮片水溶性浸出物含量按冷浸法测定不得少于52.0％，醇溶性浸出物含量不得少于13.0％。蜜炙桔梗水溶性浸出物含量按冷浸法测定不得少于53.0％，醇溶性浸出物含量不得少于21.0％。对十批中试样品炮制前后化学成分的比较研究结果表明，炮制后桔梗总皂苷均有所增加，且不同批次样品中桔梗总皂苷含量差别较大。 通过指纹图谱处理软件Chromafinger 2005 beta 0.1软件对桔梗、蜜炙桔梗指纹图谱进行相似度分析，得出桔梗饮片指纹图谱平均相似度不低于0.7；蜜炙桔梗饮片相似度不低于0.75。比较桔梗饮片与蜜炙桔梗饮片指纹图谱的区别，证明炮制后指纹图谱色谱峰面积增大。 结论：对桔梗几种不同炮制品：原药材、生品、炒黄品、蜜炙品进行了比较研究，结果表明不同炮制方法对桔梗总皂苷含量有一定影响。首次用高效液相法测定桔梗皂苷D含量，随着炮制方法不同含量随之发生变化，蜜炙后含量升高。通过正交实验优选出桔梗饮片切制工艺和蜜炙桔梗工艺简便，比较稳定。中试生产验证了优选桔梗炮制工艺的可行性；建立了桔梗、蜜炙桔梗饮片质量标准(草案)可以用来监测桔梗、蜜炙桔梗饮片质量。建立桔梗、蜜炙桔梗饮片高效液相指纹图谱不仅可以用来监测桔梗、蜜炙桔梗饮片质量，同时炮制后指纹图谱色谱峰面积增大可能是成分含量增加，此研究结果为进一步探讨桔梗炮制原理提供了新的研究方向。

目录

声明

摘要

前言

实验1 炮制对桔梗饮片中桔梗总皂苷、桔梗皂苷D含量影响

1 仪器、试剂与药材

2 桔梗饮片的炮制

3 桔梗不同炮制品中总皂苷及桔梗皂苷D含量比较

4 结果

实验2 桔梗饮片炮制工艺研究

1 桔梗饮片切制工艺研究

2 桔梗蜜炙工艺的研究

3 中试及放大生产实验

4 结果

实验3 桔梗、蜜炙桔梗饮片质量标准的研究

1 桔梗饮片、蜜炙桔梗饮片饮片性状、显微鉴别的研究

2 理化鉴别

3 桔梗饮片及蜜炙桔梗饮片TLC鉴别

4 桔梗、蜜炙桔梗饮片水分、灰分及浸出物含量的检查和限度的建立

5 桔梗、蜜炙桔梗饮片总皂苷含量测定

6 桔梗、蜜炙桔梗饮片质量标准(草案)的制定

7 桔梗、蜜炙桔梗饮片质量标准(草案)的起草说明

8 桔梗饮片稳定性考察初步研究

9 蜜炙桔梗饮片稳定诖考察初步研究

实验4 桔梗、蜜炙桔梗饮片高效液相指纹图谱比较研究

1 仪器和试药

2 实验方法

3 结果

讨 论

结 论

致 谢

参考文献

附录