小柴胡汤对急性酒精性肝损伤小鼠肝细胞凋亡及Fas/Fasl表达的影响

摘要

目的:
　　建立酒精所致小鼠急性肝损伤的实验动物模型,通过小鼠肝组织Fas/Fasl,及肝组织病理学观察,从而了解疏肝健脾法(小柴胡汤)对急性酒精性肝损伤小鼠肝细胞凋亡因子及组织形态学的影响,并与西药水飞蓟素作对照,比较它们之间的优劣,为其被广泛、深入地运用于临床防治肝损伤及研制新的防治酒精性肝损伤病变的有效方剂提供实验依据。
　　方法:
　　取普通雄性健康昆明小鼠(19.7g±2.3g)90只,随机分组法分为6组并编号为A组(空白对照组);B组(模型组);C组(水飞蓟素治疗组);D组(小柴胡颗粒高剂量组);E组(小柴胡颗粒中剂量组);F组(小柴胡颗粒低剂量组),每组15只。室环境下适应1周,自第2周起除空白对照组以等体积的蒸馏水灌胃外,其余各组均每日上午8:00灌胃给予35％二锅头白酒16ml/kg,每日1次,连续10d。治疗组于造模同时给药,自造模第1天起,每日下午17:00灌胃相应药液(20ml/kg)1次:小柴胡颗粒高剂量组13.6g/kg,小柴胡颗粒中剂量组6.8g/kg,小柴胡颗粒低剂量组3.4g/kg,水飞蓟素治疗组47mg/kg;正常组、模型组以等体积生理盐水灌胃。各组均饮用自来水,食用普通块状饲料。末次给酒后24h(禁食12h),各组取血后小鼠立即脱颈椎处死,剖腹取肝脏,观察大体外观后用滤纸吸干称重,切取新鲜肝脏组织,用4%多聚甲醛固定,待作病理切片,分别做HE染色、免疫组化检测,光镜观察并拍片。
　　结果:
　　1.在肝组织Fas及FasL表达上,诸防治组、阳性对照组与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05);与阳性对照组比较,高、低剂量组差异有统计学意义(P<0.05)。
　　2.除外空白对照组,其余五组均出现酒精性肝组织水肿,脂肪变性表现及炎症坏死;与模型组比较,各防治组及阳性对照组均可不同程度地减轻肝组织水肿、脂肪变性和炎症坏死,差异有显著性意义(P<0.01);与阳性对照组比较,小柴胡汤低剂量组效果较差,差异有显著意义(P<0.05)。
　　3.与模型组比较各防治组及阳性对照组均能不同程度地减轻小鼠的体重下降,其中小柴胡颗粒中剂量组、水飞蓟素治疗组差异显著(P<0.05),但其组间差异无统计学意义(P>0.05)。
　　结论:
　　1.与模型组比较,各防治组及阳性对照组均能减轻小鼠的体重下降,抑制酒精性肝细胞凋亡中Fas及FasL的阳性水平,减轻酒精性脂肪肝变性和炎症坏死,具有保肝作用。
　　2.小柴胡颗粒中剂量组与水飞蓟素治疗组在防治肝细胞凋亡,降低Fas及FasL阳性率,促进肝细胞再生,减轻肝脏病理表现方面疗效相当,优于小柴胡颗粒高剂量组、小柴胡颗粒低剂量组。
　　3.酒精性肝损伤的病理过程中,Fas及FasL阳性率与肝细胞凋亡程度成正比例关系,是肝细胞凋亡的重要指标。小柴胡汤可能通过抗氧化损伤,抑制炎症反应而降低Fas、FasL水平,从而起到保肝作用。

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中文摘要

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前言

材料与方法

1 实验材料

1.1 实验动物

1.2 实验药剂

1.3 实验仪器

2 实验方法

2.1 动物分组及饲养

2.2 动物模型制作

2.3 药物制备

2.4 给药方法

2.5 标本采集、提取、制备

2.6 检测指标及方法

2.7 统计学分析

结果

１ 小鼠一般情况

2 各组小鼠肝脏病理组织形态学变化

3 小鼠肝组织Fas和 FasL 阳性细胞数的比较

理论探讨

1 现代医学对酒精性肝损伤的认识

1.1 临床表现：

1． 2 病因的认识：

1.3 发病机制的认识

1.4 防治的认识

2 祖国医学对酒精性肝病的认识

2.1 病名探讨

2.2 病因病机

2.3 治则治法

3 导师学术思想

4 小柴胡汤防治酒精性肝病的作用及机理探讨

4.1小柴胡汤方证及功能特点

4.2 小柴胡汤相关方药的药理研究

5 研究中存在的问题

结论

致谢

参考文献

附录