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中药制剂对奶牛隐性乳房炎临床疗效及其免疫活性的研究

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前 言

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.2 试验方法

2 试验结果

2.1 家兔实验性乳房炎模型的建立

2.2 中药制剂防治实验性家兔乳房炎试验

2.3 中药制剂治疗临床上奶牛隐性乳房炎试验

2.4 中药制剂免疫活性的研究

3 讨 论

3.1 家兔乳房炎模型的建立

3.2 中药制剂对家兔实验性乳房炎的防治试验

3.3 中药制剂对临床隐性乳房炎的疗效试验

3.4 中药制剂免疫活性的研究

4 结论

文献综述

参考文献

附录Ⅰ 发表文章与参与科研项目

附录Ⅱ 缩略语表

缩略语表

图 版

致谢

声明

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摘要

为了研究自制中药制剂药效作用,本试验将150μL浓度为108 CFU/mL致病的金黄色葡萄球菌悬液,经乳头管注入泌乳15 d母兔乳池内,建立家兔实验性乳腺炎模型,并用中药制剂对实验性乳房炎家兔进行防治,通过治愈率、有效率、死亡率、乳汁体细胞数和外周血白细胞数,评价中药制剂防治家兔实验性乳房炎的疗效。在此基础上,用该中药对临床上隐性乳房炎奶牛进行治疗,通过治愈率、有效率、乳汁体细胞数、pH值、电导率、ALB、ALT、LDH和外周血白细胞数,评价该中药治疗奶牛隐性乳房炎的疗效。并通过研究该中药对小鼠免疫器官重量指数、小鼠外周血中性粒细胞吞噬金黄色葡萄球菌能力、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力以及家兔乳腺组织和血清中TNF-α和IL-6含量的影响,探讨中药制剂在治疗奶牛隐性乳房炎的免疫作用机制。
  动物实验结果显示:模型组母兔临床表现为精神沉郁,乳房红肿变硬,乳汁呈淡黄色粘稠状,病理组织学检查发现乳腺上皮严重脱落,乳腺组织炎性细胞浸润,严重出血,腺泡腔内没有乳汁。与对照组相比,模型组母兔乳汁中的体细胞数极显著升高(P﹤0.01),外周血中WBC含量极显著升高(P﹤0.01),结果表明经乳头管人工感染150μL108 CFU/mL致病的金黄色葡萄球菌悬液能成功建立家兔乳腺炎模型。中药治疗组的治愈率、有效率和死亡率分别为62.5%、87.5%和0%,而抗生素对照组分别为25%、37.5%和25%,中药预防组家兔乳房炎的发病率为0%,其中,中药治疗组、预防组、抗生素组的乳汁体细胞数和WBC显著或极显著低于模型组(P﹤0.05,P﹤0.01),且中药治疗组、预防组极显著低于抗生素组(P﹤0.01)。中药治疗组母兔精神状态差,但能活动,第四天后母兔行为表现接近正常,病理组织学检查发现母兔乳腺上皮轻微脱落,组织结构完整,腺泡腔内有少量 PMN浸润,腺泡腔内有乳汁分泌;中药预防组母兔表现正常,病理组织学检查发现腺泡腔内有少量 PMN浸润,间质轻微充血;抗生素组母兔临床表现和病理组织学变化与模型组基本上相似,不同于有轻微出血,腺泡腔内有少量乳汁。结果表明,该中药制剂能防治金黄色葡萄球菌引起家兔实验性乳腺炎,且明显好于青/链霉素。
  临床实验结果显示:患隐性乳房炎奶牛乳汁体细胞数、pH值、电导率、ALB、ALT、LDH和WBC显著或极显著高于健康组(P﹤0.05,P﹤0.01),泌乳量显著低于健康组(P﹤0.05),经中药制剂治疗后,乳汁体细胞数、pH值、电导率、ALB、ALT、LDH和WBC与健康组差异不显著(p﹥0.05),泌乳量升高,治愈率和有效率分别为69%和89.7%。结果表明:该中药制剂对隐性乳房炎奶牛具有良好的治疗效果。
  免疫实验结果显示:中药各剂量组都可显著或极显著增加小鼠脾指数、胸腺指数、外周血中性粒细胞和腹腔巨噬细胞的吞噬功能(P﹤0.05,P﹤0.01),且以中剂量组效果最好;该中药制剂能够使家兔血清和乳腺组织中TNF-α和IL-6水平显著降低(P﹤0.05)。结果表明:中药制剂具有良好的与乳房炎相关的免疫活性,这可能是治疗奶牛隐性乳房炎的免疫机制之一。

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