三氧化二砷结合化疗治疗难治性白血病临床观察和对Bcl-2、MDR1表达的影响研究

摘要

目的：本文通过临床观察三氧化二砷(As2O3)结合化疗治疗难治性白血病的临床效果以及应用实时荧光定量PCR(Real-time quatitative PCR,RQ-PCR)技术检测As2O3对难治病白血病患者骨髓单个核细胞MDR1、Bcl-2 mRNA表达的影响,旨在观察 As2O3 对难治性白血病的临床疗效,并初步探讨其逆转白血病细胞耐药性的作用机制。
　　方法：
　　1将符合难治性白血病诊断的患者分为治疗组23例和对照组23例。两组患者均于治疗中每 2~3 天查血常规,于治疗开始前、结束后第 1 天(化疗结束)及化疗后第14天(化疗后骨髓抑制期已过)做骨髓检查各1次,1周查心电图及肝肾功能1次。
　　2分别比较两组患者外周血血红蛋白、血小板的改变以及骨髓原始细胞下降指数(MBDI)。分别于治疗前和化疗结束后第 14 天提取各组患者骨髓中单个核细胞,提取总RNA,逆转录成cDNA(逆转录DNA),并根据GeneBank的序列设计MDR1、Bcl-2各基因及管家基因β-action引物,进行RQ-PCR。对PCR产物进行分析,并比较两组患者MDR1、Bcl-2表达的差异性以及不同类型的白血病之间两个基因表达差异。
　　3 用SPSS13.0统计软件分析数据,计量资料呈正态分布,用中位数描述；定量数据均以xs表示,两组计量资料间均数比较用t检验；等级资料用Ridit分析,检测水准α=0.05,双侧检验。
　　结果：
　　1 As2O3能够提高难治性白血病缓解率,并提高其骨髓原始细胞下降指数,能够改善其外周血血红蛋白、血小板数目。
　　2 治疗组部分患者出现肝肾功能异常、水肿、消化道反应等不良反应之后,经对症处理后恢复正常或停药之后症状消失。
　　3 基因表达：两组治疗后 MDR1 及 Bcl-2 mRNA 表达水平均有明显差异(P<0.05)。治疗组难治性髓系白血病14例,MDR1和Bcl-2 mRNA表达水平均有明显差异(P<0.05)；难治性淋巴细胞白血病6例,MDR1和Bcl-2 mRNA表达水平均无明显差异(P>0.05)。
　　结论：As2O3能够提高难治性白血病患者缓解率,提高骨髓原始细胞下降指数,改善其外周血血小板数目、血红蛋白数目,并能降低骨髓细胞 MDR1 和 Bcl-2 mRNA表达水平,且对难治性髓系白血病效果优于难治性淋巴细胞白血病。

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声明

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中文摘要

英文摘要

前言

研究对象

1 研究对象

2 主要试剂

3 主要仪器

4 液体配置

方法

1 临床研究

2 实验研究

结果

1 疗效判定

2 两组患者治疗后外周血象和MBDI变化

3 毒副作用

4 RNA质量检测结果

5 扩增产物熔解曲线分析

6 MDR1和Bcl-2 mRNA在治疗组和对照组的表达

7 治疗组MDR1和Bcl-2 mRNA在不同类型白血病中表达水平

8 脱落病例

讨论

结论

致谢

参考文献

附录

附录1 病例报告表

附录2 文献综述

附录3 攻读硕士学位期间撰写的论文