PAX2在单侧输尿管梗阻大鼠肾小管间质纤维化中的作用

摘要

目的:通过检测全长配对盒基因2(pairedbox2，PAX2)和α-平滑肌肌动蛋白(α-smoothmuscleactin，α-SMA)在单侧输尿管梗阻(unilateralureteralobstruction，UUO)大鼠肾脏组织中的表达，初步探讨PAX2在肾小管间质纤维化(renaltubulointerstitialfibrosis，RIF)中的作用机制。 方法： 48只雄性6周龄Wistar大鼠随机分为模型组和对照组，每组24只。模型组在无菌条件下左侧背部肋下切口行左侧输尿管结扎术，对照组只探及肾包膜，不结扎输尿管。于造模后第7、14、21、28天各处死大鼠6只，取左侧肾脏组织做HE和Masson染色观察肾脏病理改变，计算肾小管间质纤维化指数。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-timequantitativereversetranscriptionpolymerasechainreaction,RQ-RTPCR)方法检测肾脏组织PAX2mRNA表达，免疫组织化学方法检测肾脏组织纤维连接蛋白(fibronectin，FN)、IV型胶原(collagen-IV，Col-IV)、α-SMA和PAX2的蛋白表达。 结果： (1)病理结果显示：对照组大鼠各时间点肾小管及间质均无明显变化。与对照组比较，模型组大鼠各时间点肾小管间质纤维化指数均显著增高(P<0.05)，梗阻时间越长，肾小管间质纤维化指数越高。 (2)与对照组比较，模型组大鼠各时间点肾脏组织FN及Col-IV的蛋白表达均显著增高(P<0.01)，梗阻时间越长，FN及Col-IV的蛋白表达越高，于第28天表达最高。 (3)对照组大鼠在肾血管平滑肌肌层有α-SMA蛋白表达，偶在肾小管间质细胞表达。模型组大鼠除在肾血管平滑肌肌层有α-SMA蛋白表达外，主要在肾小管基底膜侧和肾间质细胞胞浆中表达。与对照组比较，模型组大鼠各时间点肾脏组织α-SMA的蛋白表达均显著增高(P<0.01)，梗阻时间越长，α-SMA的蛋白表达越高，于第28天表达最高。 (4)对照组大鼠肾脏组织仅有少量PAX2mRNA表达，肾小管上皮细胞未见PAX2蛋白表达，偶在肾小球囊细胞内有微量PAX2蛋白表达。与对照组比较，模型组大鼠各时间点PAX2的mRNA及其蛋白表达均显著增高(P<0.01)，梗阻时间越长，肾脏组织PAX2的mRNA及其蛋白表达越高，于第28天表达最高。 (5)直线相关分析显示：模型组大鼠肾小管上皮细胞PAX2的蛋白表达与肾间质的α-SMA、FN及Col-IV的蛋白表达均呈显著正相关(r=0.880，0.67，0.75，均P<0.05)，PAX2、α-SMA的蛋白表达均与肾小管间质纤维化指数呈显著正相关(r=0.886，0.918，均P<0.05)。 结论： UUO所致RIF大鼠肾脏组织PAX2的mRNA及其蛋白表达显著增高，可能参与了肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化(tubularepithelial-myofibroblasttransdifferentiation，TEMT)，使间质中肌成纤维细胞的数量增多，引起细胞外基质(extracellularmatnx，ECM)分泌和积聚增加，导致了RIF的发生发展。

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综述：PAX2与肾脏疾病

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