探讨FetuinA、MGP通过调控NF-KB通路对磷酸钙晶体诱导HK-2表达及释放MCP-1、TGF-β的抑制作用

摘要

目的:探讨FetuinA、MGP通过抑制NF-KB通路对磷酸钙晶体诱导HK-2表达及释放MCP-1、 TGF-β的调控作用。
　　方法:1、采用100ug/mlCaP刺激HK-2，于刺激后1、3、6、24、48、72h提取各组细胞总RNA, RT-PCR分别检测细胞于(1、3、6h)NF-KB mRNA及MCP-1mRNA、(24、48、72h)TGF-βmRNA表达水平。2、分别采用100ug/mlCaP+50mmol/L PDTC、100ug/mlCaP+100mmol/L PDTC、100ug/mlCaP+200mmol/L PDTC刺激HK-2,于(6、72h)提取细胞总RNA,RT-PCR分别检测细胞于6h MCP-1mRNA及72hTGF-βmRNA表达水平。3.分别采用100ug/mlCaP+1000ng/mlFetuinA、100ug/mlCaP+2500ng/mlFetuinA、100ug/mlCaP+5000ng/mlFetuinA、100ug/mlCaP+2000ng/mlMGP、100ug/mlCaP+4000ng/mlMGP、100ug/mlCaP+6000ng/mlMGP刺激HK-2，于刺激后3h提取各组细胞总RNA, RT-PCR分别检测细胞于3h NF-KB mRNA表达水平。4、采用100ug/ml CaP刺激HK-2，于刺激后1、3、6、24、48、72h收集细胞培养液;分别采用100ug/ml CaP+50mmol/L PDTC、100ug/ml CaP+100mmol/L PDTC、100ug/ml CaP+200mmol/L PDTC刺激HK-2，于刺激后6、72h收集细胞培养液， ELISA法检测MCP-1、 TGF-β含量。
　　结果:1、100ug/ml CaP HK-2组，NF-KBmRNA、MCP-1mRNA、TGF-β mRNA表达均高于正常对照HK-2，其中NF-KBmRNA表达于3h达高峰，MCP-1mRNA表达于6h达高峰，TGF-βmRNA表达于72h达高峰，与对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。2、100ug/mlCaP+50mmol/LPDTC、100ug/mlCaP+100mmol/L PDTC、100ug/mlCaP+200mmol/L PDTC组HK-2 MCP-1mRNA、TGF-β mRNA表达均低于100ug/mlCaP组，与对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。3、100ug/mlCaP+1000ng/mlFetuinA、100ug/mlCaP+2500ng/mlFetuinA、100ug/mlCaP+5000ng/mlFetuinA、100ug/mlCaP+2000ng/mlMGP、100ug/ml CaP+4000ng/mlMGP、100ug/mlCaP+6000ng/mlMGP组HK-2NF-KB mRNA表达均低于100ug/mlCaP组，与对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。4、100ug/ml CaP HK-2组细胞培养液上清MCP-1、TGF-β含量均高于正常对照HK-2，与对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。100ug/ml CaP+50mmol/L PDTC、100ug/mlCaP+100mmol/LPDTC、100ug/ml CaP+200mmol/L PDTC组细胞培养液上清MCP-1、TGF-β含量均低于100ug/ml CaP组，与对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。
　　结论:1.磷酸钙作用于肾小管上皮细胞诱导其释放MCP-1、TGF-β炎症介质，两者可能在Randall斑发生及发展中起到重要的作用。2.磷酸钙晶体刺激肾小管上皮细胞释放炎症介质MCP-1、TGF-β可能机制是通过激活NF-KB通路。3.FetuinA、MGP通过调控NF-KB通路，抑制MCP-1、TGF-β表达及释放，减轻肾脏炎症损伤，这可能是FetuinA、MGP参与肾结石形成机制之一。

目录

声明

个人简历

部分中英文对照表

摘要

前言

一．实验材料

二．实验方法

三、统计学处理方法

结果

讨论

全文小结

参考文献

综述 FetuinA及MGP对肾结石形成的调控作用研究进展

致谢