ICSI周期未成熟卵母细胞的体外成熟及其胚胎发育的相关研究

摘要

目的:探讨ICSI周期未成熟卵母细胞的体外继续发育潜能，评估来自控制性超排卵(COH)周期的未成熟卵母细胞的再利用价值。
　　方法:共收集广西医科大学第三附属医院生殖中心第一次行ICSI-ET助孕并采用长方案治疗的144例患者的MⅠ期及GV期卵母细胞405枚，随机分为A、B、C三组行IVM，A组:IVM培养液（对照组）共89枚;B组:IVM培养液+左旋肉碱（药物组）共97枚;C组:IVM培养液+颗粒细胞共培养（共培养组）共219枚，比较三种方案不同时间段的成熟卵率。选择C组为最佳IVM-medium。将C组培养成熟的MⅡ期卵母细胞ICSI受精后进行胚胎培养，按照新鲜组和冷冻组（C1组VS C2组）、MⅠ期组和GV期组(CⅠ组VS CⅡ组)、MⅠ-24h成熟组和MⅠ-48h成熟组（CⅠa组VS CⅠb组）等进行分组，比较各组的受精率、卵裂率、优胚率及囊胚形成率等情况。
　　结果:1.A、B、C三组MⅠ期卵母细胞24h和48h的成熟卵率分别为24.6％、30.8％、67.8％和73.8％、87.2％、89.1％，C组24h的成熟卵率明显高于A组和B组（P＜0.01），B组和C组48h的成熟卵率均高于A组（P＜0.05）。A、B、C三组GV期卵母细胞24h和48h的成熟卵率分别为8.3％、15.8％、22.2％和66.7％、73.7％、66.7％，差异均无统计学意义(P＞0.05)。
　　2.MⅠ期共培养成熟的卵母细胞（CⅠ组）玻璃化冷冻后的复苏率(85.2％)高于GV期共培养成熟的卵母细胞(CⅡ组)(58.8％)，差异有统计学意义(P＜0.05)。
　　3.共培养组中，新鲜组(C1组)的受精率、异常受精率及优胚率与冷冻组（C2组）比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），新鲜组的卵裂率显著高于冷冻组（P＜0.01）。冷冻组未获得囊胚，新鲜组卵母细胞体外成熟胚胎培养后的囊胚形成率为13.2％(5/38)。
　　4.共培养组中，MⅠ期组（CⅠ组）的受精率、异常受精率、卵裂率及优胚率与GV期组（CⅡ组）比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。GV期卵母细胞体外成熟、胚胎培养未获得囊胚。MⅠ期卵母细胞体外成熟胚胎培养能形成囊胚，囊胚形成率为10.0％(5/50)。
　　5.共培养组中，MⅠ期卵母细胞24h成熟组(CⅠa组)的受精率、卵裂率均高于48h成熟组（CⅠb组），其中卵裂率差异显著（P＜0.01），受精率差异无统计学意义（P＞0.05）。24h成熟组获得28.6％(14/49)的优胚率及10.2％(5/49)的囊胚形成率。48h成熟组未获得优质胚胎及囊胚。
　　6.体外共培养成熟的卵母细胞与同ICSI周期体内成熟组比较，受精率(59.8％ VS80.8％)、卵裂率(73.1％VS90.9％)、优胚率(31.6％ VS48.7％)均低于体内成熟组，差异均有统计学意义。两组的异常受精率(13.8％ VS9.5％)比较无统计学差异(P＞0.05)。
　　结论:1.来自COH-ICSI周期的未成熟卵母细胞能在体外成熟，未成熟卵母细胞与颗粒细胞共培养能获得更好的体外成熟结果。
　　2.MⅠ期共培养成熟的卵母细胞比GV期共培养成熟的卵母细胞可能更能耐受玻璃化冻融过程。
　　3.体外成熟的卵母细胞经过玻璃化冷冻后可能会影响其受精后的卵裂。

目录

声明

个人简历

摘要

前言

资料与方法

1．研究对象与研究设计

2．主要仪器，试剂及试剂的配制

3．研究方法

4．胚胎及囊胚评分标准

5．主要观察指标

6．统计学分析

结果

一．未成熟卵母细胞在三种IVM培养基中的成熟卵率比较

二、共培养组成熟的来源不同的卵母细胞玻璃化冷冻复苏情况比较

三、共培养组分组行ICSI受精实验室数据比较

四．实验图片

讨论

一、卵母细胞体外成熟的影响因素

二、来自超排卵周期体外成熟的卵母细胞的发育潜能分析

结论

参考文献

综述

英文缩略词

致谢