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鲍曼不动杆菌环境适应性和毒力效应的研究

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前言

第一部分 鲍曼不动杆菌环境适应性的研究

1 材料

2 方法

3 结果

4 讨论

5 小结

第二部分 鲍曼不动杆菌体外毒力的研究

1 材料

2 方法

3 结果

4 讨论

5 小结

参考文献

附录

文献综述

致谢

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摘要

本文从以下几个方面进行论述:
  第一部分 鲍曼不动杆菌环境适应性的研究
  目的:探究多重耐药鲍曼不动杆菌与敏感菌之间在生长速率、抗干燥能力、抗紫外线杀伤能力、抗血清杀伤能力之间差异,为临床管理和控制多重耐药鲍曼不动杆菌提供理论支持。
  方法:通过吸光度值法测定敏感菌和多重耐药菌在24h内的生长曲线;通过体外竞争实验比较敏感菌与多重耐药菌在相同环境中生长竞争的差异性;通过干燥实验测定75天内敏感菌和多重耐药菌对干燥环境的耐受能力;通过紫外线照射法测定敏感菌与多重耐药菌抵抗紫外线杀伤能力的差异;通过人血清杀伤实验比较敏感菌与多重耐药菌抵抗血清杀伤的能力。
  结果:敏感菌和多重耐药菌的生长曲线大致类似,对数期均处于6-12h之间,12-18h之间处于稳定期,18-24h已经处于衰退期,但多重耐药菌较敏感菌衰退的较慢。体外竞争实验发现敏感菌和多重耐药菌单独培养时,其生长曲线比较近似;两菌混合培养24h后,敏感菌和多重耐药菌菌液浓度分别为8.20和6.73Log10of CFU/mL,多重耐药菌菌液浓度较敏感菌浓度低1.43 Log of CFU/mL,差异有统计学意义(CI=0.82,P<0.05)。敏感菌和多重耐药菌耐干燥能力有一定的差异,在干燥环境中随着时间的增长,两菌株的存活率明显降低;实验进入30天后,敏感菌和多重耐药菌存活率均下降到50%左右,两者相比无差异;第45、60天时,可以看到敏感菌数量明显少于多重耐药菌,两者比较有差异(P<0.05);在第75天时,两菌均进一步减少,但多重耐药菌减少的幅度较小,敏感菌急剧减少,两者比较有差异(P<0.001)。敏感菌和多重耐药菌经紫外线照射后均出现了一定程度的减少;在15min时,两组菌存活不足50%,但两者数量相比无差异(P>0.05);在30min时,可以观察到敏感菌明显减少,存活量明显少于多重耐药菌(P<0.001);第45min时,敏感菌数量急剧减少,显著少于多重耐药菌的数量(P<0.001);第60min时,敏感菌几乎检测不到,而多重耐药菌数量下降缓慢,两者比较有显著差异(P<0.001)。敏感菌和多重耐药菌均具有抗血清杀伤能力,在正常人血清中多重耐药菌存活量明显多于敏感菌(P<0.001);在经热力处理后的失活血清中,两者存活良好,对比无差异(P>0.05)。
  结论:多重耐药鲍曼不动杆菌抗干燥能力、抗紫外线杀伤能力和抗血清杀伤能力方面均较敏感菌显著增强,在这些环境中具有更强的环境适应能力;但当其与敏感菌混合生长时,其生长竞争能力弱于敏感菌。
  第二部分 鲍曼不动杆菌的体外毒力效应研究
  目的:探究多重耐药鲍曼不动杆菌与敏感菌在生物膜形成能力和运动能力之间差异,为临床防止多重耐药鲍曼不动杆菌生物膜形成和菌株的传播提供理论基础。
  方法:通过结晶紫染色半定量法测定敏感菌和多重耐药菌的生物膜形成能力;通过蹭行运动和泳动实验比较敏感菌和多重耐药菌的运动能力。
  结果:敏感菌和多重耐药菌均可形成生物膜,从第一天开始形成,两者均在第三天生物膜量达到最大;其中多重耐药菌具有较强的生物膜形成能力,在检测的每个时间点上生物膜量均比敏感菌多(P<0.05)。敏感菌和多重耐药菌均可以进行蹭行运动,菌晕长径的均值分别为1.21cm、1.16cm,但两者长径比较并无差异(P>0.05);敏感菌和多重耐药菌泳动实验为阴性,其长径均<10mm。
  结论:多重耐药鲍曼不动杆菌生物膜形成能力较强,具有蹭行运动能力。

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