益气化瘀清热方治疗激素敏感型肾病综合征的临床观察及其对足细胞相关蛋白podocin的表达影响

摘要

1（临床部分）
　　目的:通过临床观察益气化瘀清热方治疗小儿激素敏感型肾病综合征的疗效，为临床用药提供科学依据。
　　方法:收集河南中医学院第一附属医院和郑州市儿童医院的激素敏感型肾病综合征患儿的病例，观察其在治疗前及治疗后2周、4周、8周、12周、24周及36周的24h-UTP、ALB、TG、CHOL、IgG、FIB、PT、激素相关副作用及血常规、肝肾功相关安全指标，通过统计学分析了解两组的差异。
　　结果:①疗程2周治疗组临床疗效优于对照组（P<0.05)；②治疗组复发率为9.4％，对照组复发率为32.4%，前者明显低于后者(P<0.05)；③疗程2周起治疗组在降低24-UTP及升高ALB、IgG方面优于对照组(P<0.05)；④疗程4周时治疗组在降低 CHOL及延长 PT方面明显优于对照组(P<0.05)；⑤治疗前后在 TG和FIB方面各观察时间点两组间比较无差异(P>0.05)；⑥治疗组在降低感染频次、减少汗出及急躁积分方面优于对照组（P<0.05），但对满月脸及水牛背无明显作用（P>0.05）。
　　结论:①益气化瘀清热方具有降低尿蛋白和升高血浆白蛋白、IgG的作用，且在2周内起效；②益气化瘀清热方具有降低胆固醇、FIB和延长 PT的作用，且在4周内起效；③益气化瘀清热方具有提高机体免疫功能、降低复发率、感染频次及减轻激素引起的汗出和急躁程度的作用，但其对激素引起的水牛背及满月脸无作用。
　　2（实验部分)
　　目的：通过嘌呤霉素氨基核苷（PAN）刺激诱导体外培养小鼠足细胞损伤模型，观察益气化瘀清热方及其拆方对小鼠足细胞表达 podocin的影响，探讨益气化瘀清热方对足细胞损伤的作用机理。
　　方法：体外培养足细胞，通过实时荧光定量 PCR检测不同天数和不同浓度 PAN刺激足细胞 podocin mRNA的表达情况确立模型建立的最佳时间及 PA N的浓度；并利用 PA N诱导足细胞损伤模型随机分为益气组、化瘀组、清热组、复方组、雷公藤组、对照组、模型组及控制组，分别予各类含药血清进行培养24h及48h后，采用实施荧光定量 PCR及 Wersten Blot技术检测各组对足细胞 podocin mRNA及其蛋白的表达。
　　结果：①足细胞 podocin mRNA的表达量在第7、8天高于4、5、6、9天（P<0.05），第7天与第8天无明显差别（P>0.05）。②不同浓度 PAN损伤足细胞除刺激24h时50ug/ml与75ug/ml浓度的podoicn mRNA无差异（P>0.05）外，其余提示 podocin mRNA的表达量随浓度的增加而降低（P<0.05）。③各组干预24h后复方组、雷公藤组 podocin mRNA的表达量高于对照组（P<0.05），但雷公藤组与复方组无明显差异（P>0.05）；益气组、化瘀组、清热组与对照组比较无差异（P>0.05）。④各组干预48h时化瘀组、清热组、复方组和雷公藤组 podoicn mRNA表达量高于对照组（P<0.05），其中复方组和雷公藤组作用无差异（P>0.05）,但两组作用优于清热组及化瘀组（P<0.05），而清热组与化瘀组之间无差异（P>0.05）；益气组与对照组比较无差异（P>0.05）。⑤各组干预24h时益气组、清热组和复方组 podocin蛋白表达量均高于对照组(P<0.05)，其中复方组作用强于清热组和益气组（P<0.05），而益气组与清热组无差异(P>0.05)；化瘀组与对照组无差异(P>0.05)。⑥各组干预48h复方组、化瘀组 podocin蛋白的表达量高于对照组（P<0.05），但复方组与化瘀组作用相当（P>0.05）；益气组、清热组与对照组无差异(P>0.05)。
　　结论：①本实验的模型条件设立在50ug/ml的PAN刺激，于第7天提取细胞总 RNA；②对于 PAN刺激24h后复方组对 podocin mRNA及蛋白表达降低有一定的上调作用；益气组与清热组对 podocin蛋白的表达上调有一定的作用，但对 podocin mRNA表达上调无效；化瘀组对 podocin mRNA及其蛋白表达上调均无作用；③对于 PAN刺激48h后复方组、化瘀组对上调足细胞损伤 podocin mRNA和podocin蛋白表达降低有一定作用，清热组对 podocin mRNA的表达有一定的上调作用，但对 podocin蛋白的表达无明显的上调作用，益气组对两者的表达均无明显上调功效；此外，复方组的作用总体上优于化瘀组和清热组。

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缩略词表

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前言

第一部分 临床部分益气化瘀清热方治疗激素敏感型肾病综合征的临床观察

研究对象与方法

研究结果

理论探讨

研究结论

第二部分 实验部分益气化瘀清热方及其拆方影响足细胞相关蛋白 podocin及其 mRNA 表达的实验研究

实验 1 制备 PA N 干预足细胞损伤模型

实验 2 益气化瘀清热方及其拆方对足细胞相关蛋白podocin mRNA 表达的影响

实验 3 益气化瘀清热方及其拆方对足细胞相关蛋白podocin 的表达影响

理论探讨

实验结论

致谢

参考文献

附录

附录 1：实验相关图片

附录 2益气化瘀清热方治疗激素敏感型肾病综合征临床观察表

附录 3：文献综述

附录 4：在校期间论文论著和科研情况