长链脂肪酸酯的酶催化合成环十五内酯的研究

摘要

本文分别以15－羟基十五烷酸甲酯、15－羟基十五烷酸乙酯及15－羟基十五烷酸丙酯为底物，以微生物产脂肪酶为催化剂来合成环十五内酯。研究主要内容包括四个方面：(1)合成环十五内酯脂肪酶菌株的筛选及影响环十五内酯关环因素的探讨；(2)脂肪酶对三种不同酯的内酯化选择性研究；(3)15－羟基十五烷酸甲酯和15－羟基十五烷酸乙酯的酶催化关环溶剂效应；(4)脂肪酶的分离纯化研究。 实验从15株产脂肪酶菌株GXU01-GXU015中，筛选出Candida sp.GXU08菌株对1 5－羟基十五烷酸甲酯转化为环十五内酯具有高定向催化能力。以GXU08产脂肪酶为催化剂，进行15－羟基十五烷酸甲酯的自身关环实验，并探讨脂肪酶水解活力、反应时间、反应温度、pH值等条件因素对合成反应的影响。

目录

文摘

英文文摘

第一章绪论

1.1环十五内酯简介

1.2化学法合成环十五内酯

1.3生物法合成环十五内酯

1.4主要研究内容

第二章实验设计及相关原理

2.1实验技术路线

2.2环化脂肪酶菌株的筛选

2.3 15-羟基十五烷酸甲酯酶催化合成环十五内酯环化条件研究

2.4筛选出的脂肪酶对不同酯的内酯化选择性

2.5脂肪酶的分离纯化

第三章环化脂肪酶菌株的筛选

3.1仪器与原料

3.2环化脂肪酶菌种的筛选

第四章生物法合成环十五内酯的研究

4.1材料与方法

4.2微水环境的影响

4.3脂肪酶酶活的影响

4.4反应时间的影响

4.5反应温度的影响

4.6 pH值的影响

4.7 GXU08所产脂肪酶对底物的专一性及其他影响因素

4.8 GXU08脂肪酶对底物的基团效应

第五章酶催化合成环十五内酯的溶剂效应

5.1 15-羟基十五烷酸甲酯的溶剂效应

5.2 15-羟基十五烷酸乙酯的溶剂效应

第六章脂肪酶的分离纯化研究

6.1仪器与原料

6.2硫酸铵分级沉淀粗分离发酵液

6.3离子交换层析法分离纯化脂肪酶

6.4凝胶层析法分离纯化脂肪酶

第七章结语

7.1结论

7.2展望

参考文献

附录1脂肪酶水解活力检测法

附录2 底物（15-羟基十五烷酸甲酯）气相色谱图

致谢

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