山石榴果实对小菜蛾、菜粉蝶的拒食活性研究

摘要

本文研究了山石榴果实对小菜蛾、菜粉蝶的拒食活性。采用液-液萃取和沉淀法对山石榴果实甲醇粗提物进行分离。活性跟踪结果表明，山石榴果实拒食活性成分主要存在于正丁醇萃取物和甲醇/水沉淀物中。大孔吸附树脂法分离正丁醇萃取物，得流出液、40﹪无水乙醇洗脱液、100﹪无水乙醇洗脱液3个组分。生测结果表明，100﹪无水乙醇洗脱液对小菜蛾具有较强的拒食活性，在浓度为2.5mg·mL-1时，小菜蛾24h拒食率达86.44﹪，显著高于40﹪无水乙醇和流出液；流出液、40﹪无水乙醇洗脱液和100﹪无水乙醇洗脱液对菜粉蝶幼虫都具有较好的拒食活性，24h拒食率分别为98.14﹪、97.92﹪和94.47﹪。采用硅胶柱层析法分离100﹪无水乙醇洗脱液，氯仿：甲醇：水(9：1：0.1,v/v)为洗脱剂，收集56个馏分，经TLC检测后，合并为LS1-1、LS1-2、LS1-3、LS1-4等4个组分。活性跟踪结果显示，拒食活性成分主要集中在LS1-4组分。

目录

文摘

英文文摘

1前言

1.1植物源昆虫拒食剂的研究现状

1.1.1昆虫拒食剂的定义

1.1.2拒食剂活性的生物测定

1.1.3拒食剂的作用机理

1.1.4植物源拒食剂的来源及主要活性成分

1.1.5植物源拒食剂的应用前景

1.2蔬菜害虫防治中存在的问题

1.3题依据和研究思路

2材料与方法

2.1供试材料与仪器

2.1.1供试材料

2.1.2主要药品、试剂及仪器

2.2分析方法

2.2.1薄层色谱法(TLC)分析

2.2.2高效液相色谱(HPLC)分析

2.3初筛植物粗提物的制备

2.4山石榴果实活性成分的分离

2.4.1活性部位的确定

2.4.2山石榴果实甲醇粗提中主要化学成分类型鉴定

2.4.3山石榴果实甲醇粗提物的液-液萃取与沉淀分离

2.4.4山石榴果实甲醇粗提物的柱层析分离

2.5生物活性测定方法

2.5.1毒杀作用的测定

2.5.2拒食活性测定

2.5.3致死中浓度与非选择性拒食中浓度的测定

2.6拒食行为观察

2.7数据统计分析

3结果与分析

3.1植物粗提物的生物活性筛选

3.2山石榴果实和牛耳枫茎叶粗提物生物活性测定

3.3山石榴果实活性成分分离

3.3.1活性部位的确定

3.3.2山石榴果实甲醇粗提物中主要成分的化学类型鉴定

3.3.3山石榴果实甲醇粗提物液-液萃取与沉淀分离

3.3.4大孔吸附树脂法对正丁醇萃取物的分离

3.3.5 100％无水乙醇洗脱液拒食活性成分分离

3.4拒食行为观察

3.4.1小菜蛾幼虫拒食行为观察

3.4.2菜粉蝶幼虫拒食行为观察

4结论与讨论

4.1具有杀虫、拒食活性植物的筛选

4.2山石榴果实活性成分的分离提纯与活性评价

4.3拒食行为观察

4.4山石榴研究和应用前景

4.5本论文的创新之处

4.6有待进一步研究的工作

参考文献

附录1山石榴全株及果实

附录2不同波长的HPLC图

致谢

攻读硕士学位期间发表论文情况

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