两株八角内生真菌次级代谢产物的初步研究

摘要

八角(Illicium verum Hook)又称八角茴香，是我国传统的香料和药用作物，主要种植在我国的广西壮族自治区境内。八角主要含有挥发性成分，有机酸、黄酮类、糖苷类、三萜类、无机离子等多种生理活性物质，现代医学研究表明，八角茴香具有抗菌、抗氧化、抗疲劳等作用。关于八角化学成分的研究已有大量文献报道，而关于八角内生真菌这一独特的生物类群，却鲜有相关研究报道。本论文通过研究八角内生真菌的次级代谢产物，为先导化合物的开发提供了一定的理论基础。
　　选取2株八角内生真菌fIvC1211、fIvC1217进行固体发酵培养，28℃静置培养30天，将发酵好的菌体用甲醇或乙酸乙酯浸泡三次，纱布过滤，浓缩浸泡液，45℃下旋蒸得到浸膏。发酵液乙酸乙酯萃取部分利用硅胶柱层析、重结晶、凝胶Sephadex LH-20，HPLC等多种分离手段，共分离得到16个化合物。通过IR、UV、EI-MS、ESI-MS、1H NMR、13C NMR等波谱技术，结合化合物的理化性质以及参考文献中已知化合物的波谱数据相对照，共鉴定了其中9个化合物，包括十七烷酸，十八烷酸，棕榈油酸，水杨苷，谷甾醇，7-羟基香豆素，丁二酸，大黄酚，没食子酸。
　　对从两株八角内生真菌分离鉴定的9个化合物进行虚拟筛选，表明靶标细胞质胸苷激酶，细胞色素P4501A2，DNA拓扑异构酶2，热休克蛋白酶，羰基还原酶与这9个化合物有较强的关联性，虚拟筛选的结果有助于对这些化合物生物活性机理的研究提供理论指导。

目录

声明

摘要

符号说明

第一章 绪论

1．1 八角化学成分的研究进展

1．2 植物内生真菌的研究进展

1．2．1 植物内生真菌的定义

1．2．2 植物内生真菌的生物多样性

1．3 植物内生真菌次级代谢产物的研究进展

1．3．1 抗氧化活性化合物

1．3．2 抗肿瘤活性化合物

1．3．3 抗菌活性化合物

1．3．4 抗糖尿病类活性化合物

1．4 八角内生真菌的研究进展

1．5 固体发酵

1．6 虚拟筛选在天然产物研究中的应用

1．7 本课题的研究目的与意义

1．8 本课题设计思路、研究方法及技术路线

1．8．1 设计思路

1．8．2 研究方法

1．8．3 技术路线

第二章 八角内生真菌flvC1211次级代谢产物的研究

2．1 导言

2．2 实验仪器及试剂

2．2．1 实验仪器

2．2．2 实验试剂

2．3 八角内生真菌的保存及发酵培养

2．3．1 培养基

2．3．2 菌种的保存

2．3．3 菌种的发酵培养

2．4 菌体的处理

2．5 八角内生真菌次级代谢产物的分离纯化

2．5．1 分离纯化方法

2．5．2 八角内生真菌flvC1211的分离纯化

2．6 化合物的结构鉴定

2．7 化合物的波谱数据和理化常数

第三章 八角内生真菌flvC1217次级代谢产物的研究

3．1 导言

3．2．1 实验仪器

3．2．2 实验试剂

3．3 八角内生真菌的保存及发酵培养

3．3．1 培养基

3．3．2 菌种的保存

3．3．3 菌种的发酵培养

3．4 菌体的处理

3．5 八角内生真菌次级代谢产物的分离纯化

3．5．1 分离纯化方法

3．5．2 八角内生真菌fivC1217的分离纯化

3．6 化合物的结构鉴定

3．7 化合物的波谱数据和理化常数

第四章 虚拟筛选预测天然产物作用靶标

4．1 虚拟筛选实验方法

4．1．1 配体库的构建

4．1．2 虚拟筛选方法

4．2 虚拟筛选反向对接预测八角内生真菌次级代谢产物作用靶标

4．2．1 虚拟筛选反向对接八角内生真菌(flvC1211)五个化合物作用靶标

4．2．2 虚拟筛选反向对接八角内生真菌(flvC1211)四个化合物作用靶标

4．3 小结

第五章 结论与展望

5．1 结论

5．2 研究展望

参考文献

附录

致谢

攻读硕士学位期间发表的学术论文