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论文说明:缩写表
引言
一 DMD疾病简述
二 DMD动物模型
三 DMD可能的发病机制
1细胞膜不稳定学说
2钙离子通道学说
3炎症及补体学说
4细胞凋亡学说
四 DMD治疗方法进展
(一)药物治疗
(二)基因治疗
(三)Utrophin替代疗法
(四)细胞移植
五成肌调节因子在肌肉发生中的作用
1骨骼肌发育概述
2成肌调节因子在胚胎肌肉发生中的作用
3成肌调节因子在肌肉损伤修复中的作用
六本研究的目的
材料和方法
一实验材料
(一)实验动物
(二)实验试剂
(三)实验器材
二实验技术与方法
(一)主要溶液的配制
(二)MSCs的培养和鉴定
(三)mdx鼠移植前预处理方案
(四)MSCs移植前3H-TdR的标记及移植后在体内的分布检测
(五)MSCs移植前BrdU的标记
(六)BrdU标记的MSCs的收获与移植
(七)MSCs移植后在mdx鼠体内各器官的致瘤、致畸型观察
(八)MSCs移植后肌酸激酶(CK)的测定
(九)移植后模型鼠肌肉组织HE染色
(十)移植后腓肠肌DYS的免疫荧光、RT-PCR、Western Blot检测
(十一)移植后腓肠肌utrophin的免疫荧光、RT-PCR、Western Blot检测
(十二)移植后腓肠肌MyoD、myogenin的免疫荧光、RT-PCR、Western Blot检测
(十三)移植后腓肠肌devMHC的免疫荧光、RT-PCR、Western Blot检测
(十四)数据统计
三技术路线
实验结果
一鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的培养和鉴定
(一)MSCs的形态学与生长特点
(二)MSCs表面标志物的检测
二3H-TdR标记MSCs移植后在体内分布的动态变化
1 3H-TdR对MSCs增殖功能的影响
2 MSCs尾静脉移植后在mdx鼠体内的放射性分布计数
三BrdU体外标记MSCs
四 MSCs移植后对mdx鼠致瘤性观察
五 MSCs移植后mdx鼠的肌酸激酶(CK)变化
六 MSCs移植后mdx鼠的肌肉组织病理改变
七 MSCs移植后mdx鼠DYS表达的动态变化
八 MSCs移植后mdx鼠Utrophin表达的动态变化
九 MSCs移植后mdx鼠MyoD表达的动态变化
十 MSCs移植后mdx鼠Myogenin表达的动态变化
十一 MSCs移植后mdx鼠devMHC表达的动态变化
讨论
一大鼠骨髓基质干细胞(MSCs)的基本生物学特性
二放疗对MSCs移植的影响
三MSCs移植后在体内的分布规律
四应用BrdU标记MSCs
五 MSCs移植后对mdx鼠的致瘤性
六 MSCs移植入mdx鼠体内后CK值的测定
七 MSCs移植入mdx鼠体内后肌肉病理变化
八 MSCs移植后mdx鼠的DYS表达变化
九 MSCs移植后mdx鼠的utrophin表达变化
十 MSCs移植后MRFs的表达及MSCs向骨骼肌细胞分化的机制探讨
十一展望
结论
参考文献
附录
致谢
原创性声明