生长分化因子9对小鼠体外生长成熟卵母细胞胞浆成熟度的影响

摘要

目的：本研究采用Cortvrindt建立的卵泡体外培养体系，培养小鼠窦前卵泡，比较不同直径的窦前卵泡的培养结果，说明不同分级窦前卵泡对卵母细胞成熟有否影响。检测体外培养得到MⅡ卵母细胞GSH含量、皮质颗粒迁移和分布和微管蛋白聚合情况，比较其与体内成熟卵母细胞的差异，说明这些改变与卵母细胞发育潜能降低之间的关系，为今后提高卵母细胞质量提供一定线索。追踪窦前卵泡从卵巢分离到培养最后阶段排出卵子卵丘复合物的全过程，检测卵母细胞GDF-9基因表达的变化，比较其与同阶段体内发育卵母细胞GDF-9基因表达的差异，阐明体外生长的卵母细胞在哪些阶段功能异常。本研究同时检测卵泡kitligand基因表达改变，结合卵母细胞和卵泡细胞的表现，应用卵泡发育的新的理论，探讨卵泡发育过程中与卵母细胞成熟相关的因素以及体外生长发育的卵母细胞功能异常的原因，为改善体外培养卵泡的条件提供一定依据。本研究通过对体外培养和体内生长卵泡不同阶段的分析，试图说明卵泡在哪个阶段发育异常导致最终卵母细胞的质量降低，以及哪些因素可能参与这些变化。这种动态分析有助于更有针对性改进卵泡培养体系。结论：　　1、小鼠窦前卵泡培养后可以得到MⅡ卵母细胞，目前的培养体系培养4级以上(包括4级)的卵泡，卵母细胞成熟率达到56.6％。　　2、体外发育成熟卵母细胞直径较小，GSH含量较低，皮质颗粒分布异常，正常纺锤体比例低，造成卵母细胞发育潜能低。　　3、体外发育卵母细胞在窦泡早期GDF-9基因表达异常，可能影响卵泡细胞kitligand和LH受体基因表达异常，可能是卵泡和卵母细胞发育异常的原因之一。　　4、卵母细胞GDF-9基因表达异常可能并不影响卵丘扩张。

目录

文摘

英文文摘

前言

第一部分小鼠窦前卵泡体外培养得到成熟卵母细胞

实验材料

实验方法

结果

第二部分小鼠体外发育与体内发育成熟卵母细胞胞浆成熟度与细胞骨架比较

实验材料

实验方法

结果

第三部分体外发育卵母细胞GDF-9基因表达及相关基因表达的变化

实验材料

实验方法

结果

讨论

结论

参考文献

附图1

附图2

致谢

原创性声明