siRNA沉默乙型肝炎病毒表达对HepG2.2.15细胞生长的影响

摘要

研究背景 原发性肝细胞癌占恶性肿瘤发病率的4﹪，在我国肝癌的死亡人数为各种肿瘤的第二位，每年约有11.2万人死于肝癌。而乙型肝炎病毒(HBV)的持续感染与肝癌的关系密切，是肝癌的主要病因之一。目前治疗HBV药物主要是重组干扰素及核苷类药物，但疗效仍不令人满意。RNAi是抑制基因表达的强大武器。siRNA作为一种新型强大的抑制基因表达武器，它具有高效性、特异性，副作用少的特点。 材料与方法 我们将siRNA转入含HBV病毒基因的肝癌细胞中(HepG2.2.15)，测定上清中HBsAg表达及HBV DNA拷贝数；用MTT法评估其增殖能力，用悬浮培养法观察细胞自我更新能力。 实验结果 实验发现siRNA能有效减少HBsAg分泌和HBV DNA拷贝数，其中HBsAg抑制率最高至83.9﹪，HBV DNA拷贝数抑制率从最高至73.4﹪。MTT法发现抑制率最高的siRNA转染细胞后，第五天其增殖能力均空白组明显减弱，而其他组与空白组无明显区别。而转染了siRNA的HepG2.2.15细胞球囊形成率降低。 结论 siRNA能有效减少HBV复制及蛋白表达；抑制HBV表达后能抑制HepG2.2.15细胞的增殖及自我更新能力。

目录

文摘

英文文摘

前言

第一部分HepG2.2.15细胞的鉴定

实验材料

实验方法

实验结果

讨论

第二部分siRNA抑制HepG2.2.15细胞中HBV的复制及表达

实验材料

实验方法

实验结果

讨论

第三部分siRNA抑制HepG2.2.15细胞的生长

实验材料

实验方法

实验结果

讨论

结论

参考文献

英文缩写词表

致谢

原创性声明