多药耐药肺炎克雷伯菌临床分离株的耐药性及耐药基因研究

摘要

目的：了解连云港地区多药耐药肺炎克雷伯菌的耐药情况和所携带的β-内酰酶基因、膜孔蛋白基因和可移动遗传元件的存在状况,对抗菌药物耐药机制和耐药相关基因进行研究。对了解本地区肺炎克雷伯菌的耐药流行状况、指导临床合理使用抗菌药物、研发新药的导向等具有重要意义。
　　方法：收集连云港市第二人民医院2008年11月至2009年10月住院患者标本中分离的多药耐药肺炎克雷伯菌20株，采用微量肉汤法和K-B法对21种临床常用抗生素进行药敏实验，采用PCR法检测31种耐药基因，包括A类β内酰胺酶基因TEM、SHV、CTX-M-1群、CTX-M-2群、CTX-M-8群、CTX-M-9群、CTX-M-25群、PER、GES、VEB、CARB、LAP、KPC；B类β内酰胺酶基因IMP、VIM、NDM；C类β内酰胺酶基因 LEN、OKP、DHA群；D类β内酰胺酶基因OXA-10群、OXA-48群；膜孔蛋白基因ompK36；接合性质粒遗传标记(traA、trbC)；转座子遗传标记(tnpU、tnp513)；插入序列遗传标记(IS26、ISEcp1)；整合子遗传标记(intⅠ1、intⅠ2、intⅠ3)。
　　结果：本实验20株多药耐药肺炎克雷伯菌对青霉素类药物、头孢菌素类药物、氨曲南和复方磺胺甲噁唑耐药率为100％，氨基糖苷类、喹诺酮类耐药率为80%-95%；检出4种β-内酰胺酶基因,分别为A类TEM、CTX-M-1、LAP和C类DHA；ompK36膜孔蛋白基因检测出4株为基因缺失和16株为基因突变；可移动遗传元件traA、trbC、tnpU、tnp513、IS26、ISEcp1、intⅠ1、intⅠ2、intⅠ3检出阳性率分别为10.0%(2/20)、60.0%(12/20)、45.0%(9/20)、60.0%(12/20)、100.0%(20/20)、60.0%(12/20)、95.0%(19/20)、0、0。
　　结论：本实验20株多药耐药肺炎克雷伯菌对β-内酰胺类药物耐药率很高，尤其是青霉素类、头孢菌素类、氨曲南和复方磺胺甲噁唑；除1株外均检出1至3种β-内酰胺酶基因；ompK36膜孔蛋白基因检测结果显示该蛋白均有缺陷；可移动遗传元件遗传标记的携带率较高，尤其是插入序列26和Ⅰ类整合子。提示本实验肺炎克雷伯菌多耐药的表型可能与β-内酰胺酶基因、ompK36膜孔蛋白缺陷和多种可移动遗传元件相关。

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中文摘要

英文摘要

第一章：引言

第二章：材料与方法

1.1主要仪器

1.2主要试剂

1.3 实验方法

第三章：结果

一、药敏实验结果

二、基因检测结果

第四章：讨论

一、肺炎克雷伯菌的耐药机制

二、β-内酰胺酶与相关基因

三、膜孔蛋白基因

四、可移动遗传元件

五、本实验情况

结论

参考文献

致谢

附录A英中文术语和缩略语对照表

附录B原始资料20株KPN药敏实验结果

附录C个人简历

附录D在学期间发表的学术论文

附录E 综述: 肺炎克雷伯菌耐药机制的研究进展