复方中草药对草鱼生理特性和免疫力的影响

摘要

水产养殖中环境污染和药物残留问题越来越严重，使得绿色环保、低副作用的中草药作为饲料添加剂逐渐进入科研工作者的视野。本论文以黄芪、黄芩、杜仲三种中药为基础进行复方设计，首先筛选出最适添加比例，再以生长率、鱼肉品质、免疫保护率为指标，以期筛选出一种或数种效果显著的中药配方作为饲料添加剂，并探讨在喂养过程中其对草鱼生理特性和非特异性免疫力的影响。
　　以黄芪：黄芩：杜仲=2:2:1配合成为标准复方，设定1％和2%两种中草药添加比例，统计草鱼生长率、血清酶活变化、免疫保护率。结果表明，复方中草药添加剂对草鱼生长无显著影响，而在酶活和免疫保护率方面，2%高浓度添加组效果均优于1%低浓度添加组。在标准复方的基础上，任取三种单方中两种进行两两配合组成三个新的复方，共计四个复方实验组。以草鱼生长率、鱼肉品质、免疫保护率为评价指标，结果表明，四组中药复方对草鱼生长均无显著影响。而在鱼肉品质方面，四组复方均能够不同程度地提升草鱼蛋白质和脂肪含量，其中无论是蛋白质还是脂肪含量，标准复方提升效果最好，分别达到53.84%和8.82%。攻毒结果表明，标准复方对草鱼免疫保护率最高，达38.46%。从实验结果中发现，不同的复方因组分和配比不同表现出侧重于不同功效的特性，同时，不同的中草药能够通过有效配合而发挥出更好的综合效果。
　　将四种复方作为饲料添加剂加入基础饲料中喂养草鱼，测定草鱼生长过程中血清超氧化物歧化酶、碱性磷酸酶、酸性磷酸酶、血清总蛋白浓度以及血液中红细胞、白细胞浓度、白细胞吞噬活性和草鱼肠道菌落的变化，并通过蛋白质电泳分析各个复方实验组与对照组之间血清蛋白的差异，探讨复方中草药对草鱼免疫力的影响。结果表明，四种中药复方均能够显著提升草鱼血清酶活和血清蛋白浓度，且血清酶活和蛋白浓度随着时间变化而逐渐升高，其中标准复方A对血清酶活和蛋白浓度的提升效果最好。在红细胞浓度方面，由黄芪杜仲组成的复方C和黄芩杜仲组成的复方D能显著提升草鱼红细胞浓度；至于白细胞浓度，虽然复方C和复方D使得草鱼白细胞浓度在21天内持续升高，在四组复方中效果最佳，但相比对照组无显著差别；在白细胞吞噬方面，由黄芪黄芩组成的复方B能够显著地提升草鱼白细胞吞噬百分比和吞噬指数，这表明复方B能够有效激活草鱼白细胞的吞噬功能并提升其吞噬能力。经过21天的喂养后，实验组A和C中草鱼肠道菌落数显著减少，实验组B和D中草鱼肠道菌落虽有增加但增加率小于对照组，这表明复方中草药能够有效抑制草鱼肠道菌落的生长。分析血清蛋白电泳图发现图中出现三个较为明显的差异蛋白条带。其中两条带，实验组的蛋白表达量较对照组分别上调和下调，另外一条带则是出现在实验组中的新条带，其中实验组B中浓度最高。这表明复方中草药能够有效调节草鱼体内蛋白质的表达，这是中草药饲料添加剂发挥各种功效的根本原因。

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第一章 前言

1.1中草药饲料添加剂

1.2草鱼的免疫特性及研究进展

1.3本文的研究目的及意义

第二章 复方中草药添加比例的筛选

2.1实验材料与试剂仪器

2.2试验方法

2.3结果与分析

2.4讨论

第三章 复方中草药添加剂的设计与评价

3.1实验材料与试剂仪器

3.2试验方法

3.3结果与分析

3.4讨论

第四章 复方中草药对草鱼免疫力的影响

4.1实验材料与试剂仪器

4.2试验方法

4.3结果与分析

4.4讨论

第五章 结论和展望

5.1结论

5.2展望

参考文献

致谢