鞘内注射美洛昔康对大鼠神经性疼痛疗效以及背根神经节内GAP-43和NGF表达影响

摘要

目的：建立大鼠鞘内给药（Intrathecal Injection,INTRA）模型、坐骨神经慢性压迫性损伤（Chronic constriction injury,CCI）模型；研究鞘内注射环氧化酶-2（COX-2）选择性抑制剂美洛昔康（Meloxicam,Mel）对CCI模型疼痛治疗效果及剂量差异，以及对背根神经节(Dorsal Root Ganglion，DRG)内生长相关蛋白43(Growth associated protein，GAP-43)和神经生长因子（Nerve growth factor，NGF）表达水平的影响。
　　方法：健康雄性SD大鼠35只，随机分为7组（n=5）：正常对照组（C组）、CCI造模对照组（CCI组）、不同剂量美洛昔康治疗组（Mel100ug qd组、Mel200ug qd组、Mel100ug bid组、Mel200ug bid组）和生理盐水治疗对照组（NS组）。C组：未行CCI造模的正常对照组；CCI组：行CCI造模成功但未行鞘内注药组；Mel100ug qd组、Mel200ug qd组、Mel100ug bid组、Mel200ug bid组：CCI造模成功后第1天开始给予鞘内注射美洛昔康100ug qd、200ug qd、100ug qd、200ug bid，连续7天；NS组：CCI造模成功后，鞘内注射生理盐水20ul qd，连续7天。分别于术前及术后3d、7d测试每组大鼠的机械性缩足反射阈值（Mechanical withdrawal threshold，MWT）和热缩腿潜伏期(Thermal withdrawal latency，TWL)。并于术后7d取材大鼠右侧背根神经节，制作免疫组化切片，使用ImagePro Plus6.0图像处理软件分析背根神经节内GAP-43、NGF表达水平。
　　结果：1、大鼠痛域变化：各组大鼠MWL、TWL术前基础值无明显差异。MWL、TWL从术后第1d至本实验观察的术后第7d，C组术前与术后各时间点比较差异没有统计学意义（P＞0.05），与C组比较，CCI组、Mel组、NS组均出现不同程度下降（P＜0.05）。2、术后第7d的MWL、TWL，CCI组与NS组相比差异没有统计学意义（P＞0.05）。与CCI组、NS组比较，Mel组术后第7天MWL、TWL下降程度较小（P＜0.05）。3、鞘内注射不同剂量美洛昔康对大鼠痛敏症状改善存在差异(P＜0.05)，且不能达到完全缓解，剂量越大效果越明显，单次大剂量给药优于多次间隔小剂量给药。4、背根神经节内GAP-43、NGF蛋白表达CCI组、NS组＞Mel组＞C组(P＜0.05)，其中美洛昔康剂量越大，表达越少，单次大剂量给药表达少于间隔多次小剂量给药。
　　结论：
　　1、鞘内置管长期给药模型的建立是可行的。
　　2、大鼠坐骨神经压迫损伤造模后，其MWT、TWL呈进行性下降，即出现痛觉过敏症状。
　　3、鞘内注射COX-2选择性抑制剂美洛昔康有减轻大鼠CCI模型的机械痛敏和热痛敏的作用，与治疗剂量存在一定的正相关性，但不能完全缓解痛敏症状，且存在一定封顶剂量，提示大鼠CCI模型疼痛发生还存在其他机制。
　　4、大鼠CCI模型术后DRG内GAP-43、NGF表达增加，鞘内注射美洛昔康可抑制GAP-43、NGF的高表达，且存在剂量差异。说明GAP-43、NGF可能参与了CCI模型痛敏的形成，其机制可能与环氧化酶抑制剂相关。