髓源性免疫抑制细胞(MDSCs)与S100A8在1型糖尿病患者中的表达

摘要

目的：
　　1型糖尿病（Type1 Diabetes, T1D）主要是由T细胞介导的器官特异性自身免疫性疾病，因其具体的发病机制尚未完全阐明，目前尚无根治这一疾病的有效方法。髓源性免疫抑制细胞（myeloid-derived suppressor cells，MDSCs）是一群具有多向免疫调节功能的髓系来源细胞，可介导多种肿瘤细胞逃脱机体自身免疫反应的攻击从而恶化病情。近年来，研究发现在多种自身免疫性疾病中也存在MDSCs的扩增，可在不同的疾病中扮演致病性或保护性角色。目前，国际上关于 MDSCs在 T1D中的研究主要集中在动物模型上，缺乏可靠的临床数据，尤其国内尚无TID患者的相关研究。因此，本研究旨在检测MDSCs在T1D患者外周血的表达情况及其临床意义，进一步探讨其在T1D的功能表现及作用机制，为T1D发病机制的研究及免疫抑制治疗提供新的思路。
　　方法：
　　⑴检测MDSCs的表达频率：采用流式细胞术分别检测43例T1D患者、29例2型糖尿病（Type2 Diabetes，T2D）患者与30例健康对照者外周血中MDSCs的表达情况。⑵验证MDSCs的抑制功能：采用流式细胞分选技术从 T1D患者外周血中分离出MDSCs。⑶随后采用细胞共培养技术进行MDSCs的体外抑制功能实验。⑷检测S100A8的表达水平：采用酶联免疫吸附测定法检测T1D患者与健康对照者血清中S100A8水平。
　　结果：
　　①T1D患者外周血中MDSCs表达频率分析：T1D患者外周血MDSCs的表达频率明显高于健康对照者，差异有统计学意义（P<0.01）。②T1D患者外周血MDSCs的表达频率与临床资料的相关性分析：T1D患者外周血MDSCs的表达频率与性别、年龄、病程、糖化血红蛋白、空腹C肽水平、每日胰岛素用量均未见明显相关性。③T1D与T2D患者外周血中MDSCs表达频率的比较：T1D患者外周血MDSCs的表达频率高于T2D患者，差异有统计学意义。④来源于T1D患者外周血 MDSCs的体外功能抑制实验：T1D患者外周血来源的MDSCs在体外可明显抑制anti-CD3抗体联合anti-CD28抗体诱导的外周血单个核细胞的增殖。⑤T1D患者血清中S100A8表达水平分析：T1D患者血清中S100A8蛋白浓度低于健康对照者，差异有统计学意义。⑥T1D患者外周血MDSCs与其血清S100A8相关性分析：T1D患者外周血MDSCs的表达频率与血清S100A8未见明显相关性。（P＞0.05）
　　结论：
　　T1D患者外周血中存在MDSCs的扩增，有望成为T1D与T2D新的鉴别指标。此外，在T1D患者体内扩增的MDSCs具有免疫抑制功能，可能由于血清中S100A8的下降，未能有效趋化 MDSCs迁移至效应器官发挥免疫抑制作用。该研究可为 T1D的免疫抑制治疗新思路提供初步的实验依据。

目录

声明

缩略词表

第一章 前言

第二章 材料与方法

2.1 研究对象

2.2 主要仪器和试剂

2.3 实验方法

2.4 统计方法

第三章 实验结果

3.1 T1D组、T2D组与CON组的一般资料

3.2 T1D患者外周血MDSCs的表达水平

3.3 T1D患者外周血MDSCs的功能

3.4 T1D患者血清S100A8的表达水平

第四章 讨论

1. T1D目前的免疫治疗现状。

2. MDSCs在T1D患者外周血中扩增，且具有免疫抑制功能。

3. MDSCs在T1D患者外周血的表达与性别无关。

4. MDSCs在T1D患者外周血的扩增与血糖水平无关。

5. S100A8在T1D患者血清中的表达明显下降。

6. T1D患者S100A8下调可能导致MDSCs未能有效迁移。

7. MDSCs在T1D患者外周血的扩增未能改变患者疾病现状。

8. 不足与展望

第五章 结论

参考文献

综述: MDSCs与1型糖尿病的研究进展

附录一

附录二

致谢

个人简历

论文发表情况