脂肪组织提取物对组织工程室内构建物早期血管形成及成脂化影响的研究

摘要

目的：
　　本实验拟将脂肪组织提取物注入到兔组织工程室内，通过对组织工程室内渗出液进行生化检测分析，揭示工程室内环境的变化，而后观察工程室内构建组织的组织学形态变化及血管化情况，探讨通过加强早期的血管化，能否构建较纯化的工程化脂肪组织。
　　方法：
　　1、脂肪组织提取物对血管和脂肪生成的诱导
　　利用兔腹股沟的脂肪组织，将其分离培养24小时，过滤，离心后提取上清液，ELISA检测相关因子，并将脂肪来源于细胞、血管内皮细胞和成纤维细胞加入到中提取的脂肪组织提取物(ATE)中，观察其对成脂化和成血管的作用
　　2、脂肪组织提取物注入工程室内观察组织工程室内构建组织的变化
　　构建兔脂肪组织工程室模型，实验组:在模型构建后将脂肪组织提取物1周后注入一侧工程室内，对照组:另一侧注入等量的生理盐水。分别于不同时间点观察脂肪组织工程室构建物的大体及组织学变化过程，并检测脂肪组织工程室渗出液中细胞因子及生长因子的变化。
　　3、统计学处理
　　数据以均数±标准差（(x)±s）表示，使用统计软件SPSS13.0进行数据处理。两组之问比较采用配对t检验;不同时间点的差异采用协方差分析。P值小于0.05说明具有统计学意义。
　　结果：
　　1、脂肪组织提取物(ATE)加入到到联合培养的血管内皮细胞和成纤维细胞的培养基中，血管形成实验显示ATE组血管内皮细胞形成连续的网状结构。ATE加入脂肪来源干细胞中(ASCs)的培养基中，油红O染色显示，ATE组ASCs在无成脂诱导的情况下，细胞内出现明显的脂滴聚集。
　　2、脂肪瓣的体积在注入ATE后3天、1周、2周、3周、4周、7周时，早期构建组织成胶冻状，后期软组织表面可见明显包膜形成，触之较韧。注入ATE后，实验组新生组织体积较对照组明显增大
　　3、在脂肪组织发展过程中开始阶段，对照组组和实验组均有大量新生小血管出现在间质区域，实验组组比对照组新产生的小血管密度大。随着时间推移，对照组和实验组注入组新生组织边缘纤维沉积中有大量新生血管岛状样脂肪细胞新生，实验组中边缘纤维沉积中有大量的新生的幼稚脂肪细胞，而对照组中只有零散的分布，脂肪新生提前，并且血管化逐渐成熟。后期两组新生组织已形成正常的脂肪组织小叶样结构。观察构建物的外层形成的薄膜发现，实验组新生脂肪组织边缘包膜较对照组更薄，结构排列更为规则
　　4、CD31免疫组化发现，早期血管新生和数量明显增多，注入ATE后1周总的毛细血管的数量是最高的，并且实验组较对照组多。
　　结论：
　　1、利用兔腹股沟脂肪垫提取的ATE能够改善工程室内的血管微环境，早期诱导大量血管网络新生、成熟，更快建立完善血供，促进脂肪组织新生。
　　2、同时通过改善局部血管化减轻包膜反应，去除阻止新生组织体积进一步增大的障碍，为构建有利于临床应用的工程化的脂肪组织提供新的思路。

目录

摘要

第一章 脂肪组织提取物对血管和脂肪生成影响的体外研究

1．1 引言

1．2 材料与方法

1．3 结果

1．4 讨论

1．5 结论

参考文献

第二章 脂肪组织提取物对组织工程室内构建物早期血管形成及成脂化影响的体内研究

2．1 引言

2．2 材料与方法

2．3 结果

2．4 讨论

2．5 结论

参考文献

综述 机械应力对脂肪组织的影响的研究进展

缩写词简表

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