MBL在对乙酰氨基酚所致小鼠肝损伤中的保护作用及其机制研究

摘要

对乙酰氨基酚（acetaminophen，APAP）过量是导致药物性肝损伤(drug induced liver injury，DILI)的常见原因，也是导致急性肝衰竭的最常见原因。APAP过量可介导肝实质细胞坏死，而肝实质细胞坏死后活化的天然免疫应答也是造成肝脏损伤的重要原因。因此，阐释肝内免疫微环境的稳定和调控，将为探索药物性肝损伤的预防和治疗新策略奠定基础。
　　甘露聚糖结合凝集素（mannan-binding lectin，MBL）系肝细胞分泌的血浆蛋白，是天然免疫系统中一个关键分子。MBL通过激活补体凝集素途径参与抗感染免疫应答，其在感染性和炎症性疾病中发挥免疫调节作用。然而，天然免疫系统是否参与药物代谢影响DILI的疾病进程，目前尚未见报道。
　　我们的研究发现:与野生型小鼠相比，MBL缺陷型小鼠受到APAP攻击后肝损伤加重，同时肝脏中APAP蛋白加合物的水平和代谢酶CYP2E1的水平增高，但肝脏中抗氧化剂谷胱甘肽的水平在两组中无差异，提示MBL可能通过抑制代谢酶CYP2E1的表达影响APAP的代谢，从而保护APAP诱导的急性肝损伤。研究发现，与野生型小鼠相比，MBL缺陷型小鼠受到APAP攻击后，其肝脏中转录调节因子SP1的表达和入核增加，且抑制SP1可以消除MBL对CYP2E1的抑制作用。进一步研究发现，MBL缺陷型小鼠受到APAP攻击后肝脏中ROS的水平较野生型小鼠相比增高。使用ROS抑制剂NAC提前处理小鼠后发现，WT和MBL缺陷小鼠两组间APAP所致肝损伤无显著性差异，且SP1入核受到明显抑制，MBL对CYP2E1的抑制作用消失。体外利用APAP刺激人肝细胞系HepaRG细胞发现，MBL可下调细胞内ROS水平，阻抑SP1入核进而抑制CYP2E1的表达。
　　综上，我们发现MBL通过抑制CYP2E1的表达，在APAP代谢所致的肝损伤中发挥保护作用。机制研究表明，MBL对CYP2E1的抑制作用是通过影响ROS/SP1/CYP2E1通路实现的。该结果或将为MBL缺损者的临床用药指导及DILI的临床辅助治疗提供新的见解和理论依据。

目录

摘要

前言

第一章 MBL在APAP诱导的急性肝损伤中的保护作用

1．1 材料和方法

1．2 结果

1．3 讨论

1．4 本章小结

第二章 MBL在APAP诱导的药物性肝损伤中的作用机制研究

2．1 材料和方法

2．2 结果

2．3 讨论

2．4 本章小结

全文总结

参考文献

中英文对照缩略词语表

在读期间发表及待发表的文章

致谢

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