低声压级次声对局灶性脑梗死大鼠认知、运动功能和内源性神经干细胞增殖的影响

摘要

目的：
　　认知、运动、语言和吞咽等功能障碍常见于脑卒中的患者，极大地损害了患者的生活自理能力，降低患者的生存质量，是患者个人、家庭和社会不可忽视的问题。根据国内外的研究及本团队的前期研究基础，低声压次声可改善脑缺血大鼠的功能状态。低声压次声通过机械共振作用可疏通微小血管，减轻脑组织梗死程度，促进神经元间的联系，体外可以促进干细胞的增殖，并且由于其穿透性强的特性，即使存在颅骨的阻隔包裹，依然可以穿透颅骨将机械共振作用传达到颅内组织。因此，本实验旨在通过建立局灶性脑缺血大鼠模型的实验，观察低声压级次声治疗后局灶性脑梗死大鼠的认知、运动功能变化情况，并通过Brdu标记及免疫荧光观察其脑组织中NSCs增殖的标记物5-溴脱氧尿嘧啶核苷酸(Brdu)和巢蛋白(Nestin)的表达程度，探讨低声压级次声对神经系统的保护机制，为脑缺血疾病提供新的治疗手段。
　　方法：
　　制备右侧大脑中动脉脑缺血再灌注(MCAO)大鼠模型，以Infrasound8TM次声治疗仪作为处理因素。将36只SD大鼠随机分为3组，分别是假手术组(n=12)、手术组(n=12)、次声组(n=12)，其中假手术不进行栓塞。造模成功12小时后，次声组开始每天次声治疗1小时，其余两组置于作用探头下，但无能量输出。观察干预后第3、7和14天时各组的改良神经功能缺损评分情况，在造模后第3-6天进行Morris水迷宫训练，记录各组大鼠的逃逸潜伏时间及最后1天各组大鼠跨越平台次数。各组大鼠分别在三个时间点处死前32小时进行腹腔注射Brdu，每次间隔4小时，共3次。末次注射24小时后进行灌注取脑，切片做免疫荧光双标染色，检测脑组织中5-溴脱氧尿嘧啶核苷酸(Brdu)阳性细胞数及巢蛋白(Nestin)阳性累积光密度IOD值。
　　结果：
　　与手术组相比，次声组在三个时间点的认知功能及运动功能情况均明显改善(P＜0.05)。第3、7、14天神经干细胞表达情况分别为次声组＞手术组＞假手术组，比较差异均有统计学意义(P＜0.05)。随着治疗天数的增加，次声组神经干细胞增殖量呈递增趋势，比较差异均有统计学意义(P＜0.05)。而手术组第7天的神经干细胞增殖较第3天增加，比较差异有统计学意义(P＜0.05)。第14天与第7天比较差异无统计学意义(P＞0.05)。
　　结论：
　　低声压级次声治疗可促进梗死灶脑组织的神经干细胞增殖，延长其增殖时长，改善大鼠的认知、运动功能，发挥神经保护和修复作用。

目录

摘要

第一章 研究背景

1．1 脑卒中的认知及运动功能障碍现状

1．2 物理因子对脑卒中的治疗作用及相关机制

1．3 低声压级次声脑卒中的治疗作用及研究目的

第二章 实验材料与实验方法

2．1 实验材料和仪器

2．2 实验对象和方法

第三章 实验结果

3．1 改良神经功能缺损程度评分

3．2 认知功能评估

3．3 激光共聚焦显微镜下观察结果

3．4 Brdu／Nestin荧光双标染色结果

第四章 讨论

第五章 结语

参考文献

中英文简写对照表

致谢

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