重组IL-5作为卵透明带DNA避孕疫苗粘膜免疫佐剂的研究

摘要

为探讨利用白细胞介素5作为佐剂增强粘膜免疫反应,提高卵透明带DNA避孕疫苗的抗生育效能的可行性,本研究首先以含有小鼠白细胞介素5(mIL-5)cDNA的质粒为模板,PCR扩增44～445之间的DNA片段(含信号肽和成熟肽序列),以质粒pVAX1为载体构建了真核细胞表达质粒pVAX1-mIL-5。通过脂质体转染导入HeLa细胞,并采用间接免疫荧光技术(IIF)检测到了mIL-5在HeLa细胞中的表达。然后,用壳聚糖C390和重组质粒pVAX1-mIL-5制备纳米微粒,经测定壳聚糖对质粒DNA的包裹率达95％以上。用pVAX1-mIL-5和卵透明带避孕疫苗pVAX1-pZP3α壳聚糖纳米微粒口服免疫小鼠。实验小鼠分为三组,每组6只雌鼠。A组单独用卵透明带DNA避孕疫苗pVAX1-pZP3α免疫,B组以pVAX1-mIL-5质粒为佐剂,与DNA疫苗共免疫,C组为空白对照组,每组动物接受3次免疫(0、3、6周)。用ELISA法检测小鼠血清及阴道分泌液中抗ZP3IgA抗体反应。

目录

独创性声明及学位文版权使用授权书

第一部分 前言

第二部分 材料与方法

第三部分 实验结果

第四部分 讨论

第五部分 参考文献

附录Ⅰ 本研究中所用常规实验方法

附录Ⅱ 本研究中所用试剂配方

附录Ⅲ 重组质粒pVAX1-mIL-5的完整序列

附录Ⅳ 英文缩略词索引

附录Ⅴ 在校期间发表研究论文情况

致谢