林荫银莲花的三萜皂苷类成分研究

摘要

林荫银莲花Anemone flaccida Fr. Schmidt为毛茛科(Ranunculaceae)银莲花属植物,主要分布于四川、贵州、湖南、湖北、浙江等省区,多生长于林下阴湿处,故名“林荫”银莲花。林荫银莲花以其根茎入药,名为“地乌”,又名地雷、黑地雷、金串珠、蜈蚣三七等,具消肿止痛、祛风湿等功效,可用于治疗风湿痹痛、跌打损伤等症,在民间习用于治疗类风湿性关节炎。前期研究表明,三萜皂苷类化合物为林荫银莲花的主要化学成分,以其总皂苷部位制成的抗类风湿性关节炎的中药5类新药,目前已进入Ⅲ期临床试验阶段,但其抗类风湿关节炎的药效物质基础尚不十分明确。
　　为进一步探索林荫银莲花抗类风湿性关节炎的药效物质基础,本论文对其总皂苷部位进行了系统的化学成分研究。采用多种色谱分离手段,从林荫银莲花总皂苷部位分离得到了21个三萜皂苷类化合物,并综合运用各种波谱技术鉴定了它们的结构,分别为:3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-β-D-吡喃木糖桦木酮酸28-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯(flaccidosideⅣ, AF-1)、3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-β-D-吡喃鸡纳糖齐墩果酸28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯(flaccidosideⅤ, AF-2)、3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖齐墩果酸28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯(flaccidosideⅥ, AF-3)、3-O-β-D-吡喃木糖齐墩果酸28-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯(flaccidosideⅦ, AF-4)、3-O-β-D-吡喃葡萄糖齐墩果酸28-O-β-D-吡喃葡萄糖酯(lucyoside H, AF-5)、3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-β-D-吡喃木糖齐墩果酸28-O-β-D-吡喃葡萄糖酯(giganteasides G, AF-6)、3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸28-O-β-D-吡喃葡萄糖酯(mateglycoside D, AF-7)、齐墩果酸28-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯(asteryunnanoside F, AF-8)、3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸齐墩果酸28-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯(hemsgiganoside B, AF-9)、3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖齐墩果酸28-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯(AF-10)、3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-β-D-吡喃木糖齐墩果酸28-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯(anhuienoside C, AF-11)、3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸28-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯(AF-12)、齐墩果酸28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯(cussonoside B, AF-13)、3-O-β-D-吡喃葡萄糖齐墩果酸28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯(nipponoside B, AF-14)、3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸齐墩果酸28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯(AF-15)、3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖齐墩果酸28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯(anhuienosides E, AF-16)、3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-β-D-吡喃木糖齐墩果酸28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯(flaccidosideⅡ, AF-17)、3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→2)-β-D-吡喃木糖齐墩果酸28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯(flaccidosideⅢ, AF-18)、3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯(hederasaponin B, AF-19)、3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖醛酸齐墩果酸28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯(AF-20)和3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→2)-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-β-D-吡喃木糖齐墩果酸28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯(anhuienoside F, AF-21)。以上化合物中,AF-1~AF-4为4个新的三萜皂苷类化合物,AF-6~AF-8、AF-11、AF-12、AF-20和AF-21为首次从该植物中分离得到。
　　此外,本论文还对分离得到的21个三萜皂苷类化合物进行了体外抗炎活性测试。分别测试了各化合物在不同浓度下对脂多糖(LPS)所诱导的巨噬细胞(RAW264.7)释放NO的抑制率(％),其中AF-2、AF-3、AF-7、AF-11、AF-17、AF-19和AF-21对RAW264.7细胞释放NO显示出较明显的抑制作用。

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缩略词表

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第一章 银莲花属植物中三萜皂苷类化合物的化学成分和药理活性研究进展

第一节 化学成分研究

第二节 药理活性研究

参考文献

第二章 林荫银莲花的三萜皂苷类成分研究

第一节 新化合物的结构鉴定

第二节 已知化合物的结构鉴定

参考文献

第三节 实验部分

第三章 林荫银莲花皂苷类化合物体外抗炎活性初步研究

一、实验仪器与材料

二、抗炎活性筛选实验

三、抗炎活性筛选结果

总结

致谢

附图目录

附图