异种胚胎移植中小鼠子宫着床窗口期分子的差异性变化

摘要

胚胎着床是正常妊娠的必要前提，而胚胎的着床与否，不仅仅是由子宫决定的，胚胎在着床过程当中也起到了一定的作用。胚胎着床是胚胎与子宫的相互影响的结果，其中既要有具备着床能力的正常发育中的胚胎，又要有具备接受能力的正常子宫。胚胎与子宫间存在着一些交互作用，在相互的影响中，不断的调整，直到准备好胚胎着床所需要的条件。目前，胚胎着床过程中，胚胎对于子宫存在的影响的研究结果仍然较少。
　　我们利用异种胚胎移植的方法，将发育正常并且阶段相同的大鼠与小鼠囊胚，通过移植的方法，将不同的囊胚移植到假孕小鼠子宫中，来检测异源性的胚胎对于妊娠中的小鼠子宫所产生的影响。通过基因芯片、原位杂交、免疫组织化学技术、实时荧光定量技术来检测不同水平的不同分子的差异性变化。
　　通过实验发现，异种来源的囊胚对于小鼠子宫存在着诸多方面的影响：首先，子宫窗口期标志性分子的表达存在差异性，p-STAT3与Muc1在异种来源的大鼠囊胚的影响下，子宫的腔上皮与腺上皮都有明显的减弱， ERα在大鼠囊胚的影响下，小鼠腺上皮与基质中的表达均有着明显的增强；其次，细胞周期相关性分子，如Ccnb2、Cyp26b1等，在大鼠囊胚移植组中的基因表达量有明显的升高，同时，Ki67也在mRNA水平有显著的上调；最后，先天免疫中的补体系统相关的分子Olr1与CD55也存在着差异性的变化，Olr1在BeWo细胞球移植组中，相比于小鼠囊胚移植组有下调，而CD55在蛋白水平则有加强。除此之外，原位杂交实验中Rpl26作为p53蛋白水平的调节分子，在异种移植组中的信号范围与信号强度相比于小鼠囊胚组，都有着明显的增强。
　　总之，通过异种胚胎移植的方法，检测到了多水平多方面的差异性变化，这些变化表明了胚胎在着床期间，不仅与子宫存在着交互，而且还能够在众多方面影响子宫的功能性变化。与此同时，子宫也通过自身的调节，产生适应性的反应调整来自胚胎的影响。

目录

声明

中英文缩略词表

1 引言

1.2胚胎着床

1.3胚胎着床的免疫特性

1.4类固醇激素及其受体在胚胎着床过程中的作用

1.5胚胎着床的分子调控

1.6 p-STAT3/Bcl2/p53信号通路

1.7补体系统

1.8胚胎着床时期的细胞周期与细胞增殖相关分子

1.9本研究的目的和意义

2. 材料与方法

2.1 实验动物

2.2 动物实验模型

2.3 胚胎移植

2.4 原位杂交

2.5 免疫组化

2.6小鼠子宫内膜细胞培养

2.7 Real-time PCR

2.8 BeWo球制备

3. 结果

3.1 芯片测序结果

3.2 窗口期分子的检测

3.3 细胞增殖与细胞周期相关分子的表达

3.4 其他分子的表达

3.5 BeWo球的制备

4 讨论

4.1 窗口期分子的差异性表达

4.2 细胞增殖与细胞周期相关分子的差异性表达

4.3 其他分子的表达差异性

5 总结

致谢

参考文献