热熔挤出固体分散制备工艺对穿心莲提取物药物动力学的影响研究

摘要

目的：穿心莲是《中华人民共和国药典》（2010年版）收载的一味华南区大宗中药材，药理及临床作用明确，一直备受国内外广大学者的关注，其综合开发技术研究获得国家科技支撑计划资助(项目代码：2011BAI01B00)。但由于穿心莲的有效成分穿心莲二萜内酯难溶于水，使其在现有成药制剂中的溶出度和生物利用度受到限制。为提高穿心莲的生物利用度，本文采用热熔挤出技术制备固体分散体，并结合体外溶出度和体内血药浓度法，评价热熔挤出固体分散制备工艺对穿心莲提取物药物动力学的影响，为开发具有更高生物利用度的穿心莲成药制剂奠定理论基础。
　　方法：⑴指标成分体外分析HPLC含量测定方法建立。建立同时检测脱水穿心莲内酯和穿心莲内酯的HPLC含量测定方法，用于后续实验中热熔挤出固体分散体的载体种类筛选、工艺保留率测定和溶出度测定等。⑵处方前理化性质研究。根据穿心莲提取物的性质及热熔挤出固体分散体的剂型和工艺要求，考察穿心莲提取物中两指标成分的热稳定性和表观溶解度，为处方设计提供基础。⑶热熔挤出固体分散制备工艺研究。以脱水穿心莲内酯、穿心莲内酯的工艺保留率和溶出度为评价指标，对热熔挤出固体分散制备工艺进行优化，包括载体种类筛选、载体与药物用量比筛选和热熔挤出参数考察等。并以同批次穿心莲提取物为原料制备穿心莲片，比较穿心莲片与穿心莲热熔挤出分散体的溶出度。⑷热熔挤出固体分散体体外性质研究。通过差示扫描量热分析实验（DSC）、电镜扫描实验（SEM）和 X-射线衍射实验（XRD）对穿心莲热熔挤出分散体进行物相鉴别，并比较穿心莲片与穿心莲热熔挤出分散体的体外性质。⑸热熔挤出固体分散体的药物动力学研究。采用LC-MS/MS检测方法，测定SD大鼠灌胃给药穿心莲提取物、穿心莲热熔挤出固体分散体、穿心莲片后脱水穿心莲内酯的血药浓度，并比较药物动力学参数。
　　结果：①建立了同时测定脱水穿心莲内酯和穿心莲内酯的HPLC含量测定方法，包括流动相、流速、柱温等色谱条件，为后续实验中热熔挤出固体分散体的载体种类筛选、工艺保留率测定和溶出度测定等提供了实验基础。②处方前理化性质研究中，热稳定性实验结果显示，脱水穿心莲内酯和穿心莲内酯两指标成分在低于160℃受热40分钟时含量基本稳定，而当受热温度高于160℃时，两成分含量降低显著；表观溶解度实验结果显示，脱水穿心莲内酯和穿心莲内酯均在0.2%十二烷基硫酸钠溶液（SDS）中具有最大表观溶解度。提示后续热熔挤出固体分散制备工艺中，实验温度应控制在160℃以下，体外溶出介质优选0.2%十二烷基硫酸钠溶液。③热熔挤出固体分散制备工艺研究结果显示，以脱水穿心莲内酯和穿心莲内酯在制剂中的百分含量、工艺保留率和溶出度为评价指标，筛选得到最优工艺路线为：以soluplus为载体，穿心莲提取物与soluplus投料比为1:2，热熔挤出参数中区段升温程序为130℃-135℃-140℃-130℃，螺杆转速为25-30r/min，加料速度为15g/min。④对制得的热熔挤出固体分散体进行物相鉴别，差式扫描量热分析实验、电镜扫描实验、X-射线衍射实验结果共同显示：热熔挤出固体分散制备工艺可抑制穿心莲提取物中的药物结晶，使其呈无定形态分散，且抑制程度显著强于物理混合。⑤药物动力学研究结果显示：大鼠分别灌胃穿心莲提取物、穿心莲片、穿心莲热熔挤出固体分散体后，脱水穿心莲内酯在大鼠体内最大血药浓度(Cmax)分别为1.76±0.70μg/mL、2.36±0.92μg/mL、3.38±0.81μg/mL；达峰时间（Tmax）分别为34.0±8.9 min、36.0±13.4 min、26.0±5.5min；尿药排泄速度常数（Ke）分别为0.027±0.012min-1、0.024±0.006min-1、0.044±0.012min-1；药-时曲线下面积（AUC0-t）分别为118.5±21.8 mg·L-1·min、164.7±59.2 mg·L-1·min、165.8±34.9 mg·L-1·min；平均滞留时间（MRT0-t）分别为71.0±13.8 min、70.6±10.2 min、53.9±7.5 min。提示热熔挤出固体分散制备工艺能显著提高脱水穿心莲内酯的最大血药浓度和尿药排泄速度，并减少药物在体内的平均滞留时间，从而有利于体内吸收和生物利用度的改善。
　　结论：⑴穿心莲热熔挤出固体分散制备工艺为：以 soluplus为载体，穿心莲提取物与soluplus按1:2投料，热熔挤出加料速度为15g/min，螺杆转速为25-30r/min，区段升温程序设置为130℃-135℃-140℃-130℃。⑵热熔挤出固体分散制备工艺能提高穿心莲提取物中脱水穿心莲内酯的最大血药浓度和尿药排泄速度，并减少药物在体内的平均滞留时间，从而有利于其体内吸收和生物利用度的提高。

目录

声明

引言

第一章 文献研究

1.1 穿心莲制剂研究现状

1.2 固体分散技术的研究现状

1.3 热融挤出技术的研究现状及发展趋势

第二章 指标成分体外分析HPLC含量测定方法建立

2.1 仪器与试药

2.2 穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯HPLC含量测定方法建立

2.3 小结与讨论

第三章 处方前理化性质研究

3.1 仪器与试药

3.2 穿心莲提取物中指标成分含量测定

3.3 指标成分热稳定性实验

3.4 表观溶解度测定

3.5 小结与讨论

第四章 热熔挤出制备工艺研究

4.1 仪器与试药

4.2 载体种类与挤出参数筛选

4.3 载体用量筛选

4.4 小结与讨论

第五章 热熔挤出固体分散物体外性质考察

5.1 仪器与试药

5.2 差式扫描量热分析（DSC）

5.3 电镜扫描实验（SEM）

5.4 X-射线衍射实验（XRD）

5.5 小结与讨论

第六章 热熔挤出固体分散体药物动力学研究

6.1 药品与试剂

6.2 仪器与测定方法HC-3018高速离心机

6.3 实验方法与结果

6.4 小结与讨论

结语

1 总结

2 本论文的特色和意义

3 问题与展望

参考文献

在校期间发表论文情况

致谢