以标准煎液为参照的丹参木耳降脂复方提取工艺研究

摘要

“丹参木耳降脂复方”为我国部分地区现代民间饮食验方，应用数十年，主要用于血脂偏高的相关病症（如高血脂症、冠心病及动脉粥样硬化、脂肪肝、糖尿病、肥胖等），亦是延缓衰老、增强体质、调节脏腑功能失调以及清除“体内垃圾”的保健佳品，广受民间百姓的青睐。其口感良好，服用后降脂效果显著，作用温和而无毒副作用，是高血脂病症这类型的慢性病患者用药的较好选择。
　　原方临床上主要以汤剂形式服用，但是汤剂不便煎煮、携带和储存，不利于该方广泛应用于临床，而且目前中药研究开发存在较多中成药不如原方汤剂疗效的情况，故本研究制定了“采用以复方标准煎液为参照，尽可能保证制剂成品各项特征接近甚至优于原方”的总思路，以确保制成颗粒剂后临床疗效尽可能一致。
　　目的：
　　将丹参木耳降脂复方开发成与原方临床常用剂型的疗效尽可能接近的颗粒剂，从而发挥原汤剂起效迅速、无毒副作用和疗效显著的优势，同时克服汤剂不便煎煮、携带、储存和运输等缺点，使其更广泛地服务于高脂血症患者。
　　方法：
　　1.选取合格的丹参药材制备丹参标准煎液,建立丹参标准煎液的物理参数（相对密度、pH以及出膏率），并采用高效液相色谱（HPLC）法对丹参标准煎液的丹参素、丹酚酸B和丹参酮ⅡA的含量进行测定，使用薄层色谱（TLC）法定性鉴别水溶性和脂溶性成分，再用指纹图谱技术建立丹参标准煎液的指纹特征，从而全面评价丹参标准煎液的质量，为后续研究提供参考依据。
　　2.建立木耳的质量评价方法，从市售8种常用品种中筛选出质量最优的品种作为组方药材，从而保证药材来源、疗效稳定以及提高用药安全性。
　　3.建立丹参木耳复方标准煎液，通过测定其主要物理参数、主要药效物质丹参素、丹酚酸B、丹参酮ⅡA、总多糖的含量，采用TLC法鉴别其水溶性成分及脂溶性成分，建立丹参木耳复方标准煎液的指纹特征图谱，从而从定性和定量两大方面来反映丹参木耳复方标准煎液的基本特征。
　　4.以丹参木耳降脂复方标准煎液为参照，采用单因素试验确定较大影响因素和水平范围，再通过正交设计试验法和星点设计-效应面法（CCD-RSM）同时对丹参木耳降脂复方提取工艺进行研究，分别优选出与复方标准煎液各项特征基本相似的工艺为最佳工艺，再综合两种方法优选出的工艺参数，确定最终提取工艺。
　　5.比较单煎液、提取工艺的优选工艺产物与复方标准煎液整体特征的相似性，决定是否能对最终确定的提取工艺进行放大试验研究，从而验证提取工艺的可行性。
　　结果：
　　(1)本研究采用的丹参药材符合2010版中国药典的要求，其所制备11批标准煎液的相对密度、pH以及出膏率分别为1.0152±0.0020、5.83±0.07、34.49%±0.89%；丹参素、丹酚酸B、丹参酮ⅡA的含量分别为90.09±4.51、2233.85±97.40、3.83±0.13μg/mL；水溶性和脂溶性成分 TLC结果显示为斑点清晰，分离良好、无明显杂质干扰，重复性良好；11批标准煎液指纹特征图谱共有10个共有峰，相似度均大于0.9。
　　(2)市售8个常用木耳品种中以东北秋耳质量最好，总多糖含量和出膏率分别为36.66%±0.60%、51.94%±1.44%。
　　(3)10批丹参木耳降脂复方标准煎液相对密度、pH以及出膏率分别为1.0023±0.0007、5.20±0.02、34.39%±0.83%；丹参素、丹酚酸B、丹参酮ⅡA和总多糖的含量分别为47.30±2.44、378.38±12.50、0.21±0.01、1816.86±41.86μg/mL；水溶性和脂溶性成分TLC结果显示为斑点清晰，阴性无明显干扰，重复性良好；11批复方标准煎液指纹特征图谱共有14个共有峰，相似度均大于0.9。
　　(4)提取温度对提取工艺影响最大，综合正交试验与CCD-RSM试验的优选工艺参数，确定与复方标准煎液各项特征基本相似的工艺为最佳工艺：100℃提取3次，每次加水42BV,每次提取2h。
　　(5)复方煎液优于单煎液，提取工艺优选工艺产物与复方标准煎液相似性良好，因此进行了提取工艺放大试验研究，验证了确定的提取工艺的可行性。
　　结论：
　　本研究建立的丹参标准煎液特征参数、木耳质量评价方法稳定可靠，为丹参木耳降脂方标准煎液的特征参数的建立提供了方法和依据；而以丹参木耳降脂复方标准煎液为参照，采用单因素试验、正交设计试验和CCD-RSM法筛选出的最佳提取工艺稳定可靠，二者差异不大；提取工艺优选工艺产物与复方标准煎液的相似性比较和放大试验证实了所确定的提取工艺具有可行性，为丹参木耳降脂复方颗粒的后续制备研究及将来的深入研究奠定了基础。

目录

声明

引言

第一章 文献研究

第一节 现代医学对高脂血症的认识及治疗进展

第二节 中医对高脂血症的认识与治疗进展

第三节 高血脂防治药物研究与应用现状及趋势

第四节 丹参木耳降脂复方的研究概况

第二章 丹参标准煎液质量标准及指纹特征图谱研究

第一节 丹参药材质量评价

第二节 丹参标准煎液丹参素、丹酚酸B、丹参酮ⅡA的含量测定及其物理参数建立

第三节 丹参标准煎液中水溶性成分和脂溶性成分的薄层鉴别

第四节 丹参标准煎液的指纹特征图谱研究

第三章 木耳质量评价的研究

1 仪器与试药

2 方法与结果

3 小结

第四章 丹参木耳降脂复方标准煎液质量标准及指纹特征图谱研究

第一节 丹参木耳降脂复方标准煎液丹参素、丹酚酸B、丹参酮ⅡA、总多糖含量测定

第二节 丹参木耳降脂复方标准煎液的物理参数的建立和薄层色谱鉴别

第三节 丹参木耳降脂复方标准煎液的HPLC指纹特征图谱的研究

第五章 丹参木耳降脂复方提取工艺研究

第一节 正交试验设计法及星点设计-效应面优化法优选复方提取工艺

第二节 提取工艺优选工艺产物的评价与提取工艺放大试验研究

第六章 结语

1 讨论

2 展望

参考文献

硕士期间发表的论文

致谢