壳聚糖降解真菌的分离鉴定及其对香蕉枯萎病的生物防治

摘要

壳聚糖是地球上含量丰富的天然高分子碳水化合物,在工业、农业、医药和环保等各个领域都有应用,但它的不溶性成为其广泛应用于生产上的制约因素。而壳聚糖酶的降解产物壳寡糖具有更好的水溶解性、独特的生物活性和生理功能,倍受研究者的关注。本论文主要从以下几个方面进行了研究:
　　 从广东、海南等地采集的142份土样,采用壳聚糖为唯一碳源和氮源的培养基进行筛选,共获得363株真菌。对香蕉枯萎病菌进行抑菌效果测定,获得一株抑制效果较好的菌株,编号为080409-13。对峙培养法测定该菌株对香蕉枯萎病菌的抑制率为60.74％;用不同浓度的发酵滤液测定该菌株对香蕉枯萎病菌的抑制作用结果表明,抑制作用随着浓度的升高而升高,终浓度为5％的发酵滤液对香蕉枯萎病菌的抑制率为62.00％,且表现出明显的后续作用;盆栽防治效果表明,在107个/mL的孢子原液的50×稀释液条件下,拮抗真菌080409-13对香蕉枯萎病防治效果最好,为83.34％。
　　 菌株080409-13经形态学观察和ITS序列分析,鉴定为淡紫拟青霉。生物学特性测定结果表明:适合该菌株生长的温度范围为5-40℃,最适生长温度为29℃;080409-13菌株有较好的pH耐受性,在pH值4-10的范围内均可以生长。

目录

文摘

英文文摘

1 前言

1.1 壳聚糖研究概况

1.1.1 壳聚糖简介

1.1.2 壳聚糖的应用

1.1.3 壳聚糖的降解途径

1.2 壳聚糖酶研究

1.2.1 壳聚糖酶的发现

1.2.2 壳聚糖酶的来源

1.2.3 壳聚糖酶的分离纯化

1.2.4 壳聚糖酶的性质

1.3 壳聚糖酶及其降解产物的应用

1.3.1 壳聚糖酶在植物病害防治中的应用

1.3.2 壳聚糖降解产物即壳寡糖的应用

1.4 香蕉枯萎病的危害及防治

1.4.1 香蕉枯萎病的发生与危害

1.4.2 香蕉枯萎病的防治研究

1.4.3 香蕉枯萎病的抗病育种

1.4.4 香蕉枯萎病的生物防治

1.5 本研究的目的和意义

2 壳聚糖降解真菌的分离筛选及其对香蕉枯萎病的防治

2.1 实验材料与方法

2.1.1 实验材料

2.1.2 实验方法

2.2 结果与分析

2.2.1 壳聚糖酶产生菌的平板筛选结果

2.2.2 拮抗真菌080409-13对香蕉枯萎病菌的抑制作用

2.2.3 拮抗真菌080409-13对其他枯萎病菌的抑制作用

2.2.4 拮抗真菌080409-13发酵滤液对香蕉枯萎病菌的抑制效果

2.2.5 拮抗真菌080409-13对香蕉枯萎病的盆栽防治效果

2.3 结论与讨论

2.3.1 壳聚糖酶产生菌的分离筛选方法

2.3.2 壳聚糖酶产生菌对香蕉枯萎病的生物防治

3 筛选菌080409-13的初步鉴定及其生物学特性研究

3.1 实验材料与方法

3.1.1 实验材料

3.1.2 实验方法

3.2 结果与分析

3.2.1 080409-13菌株的形态特征

3.2.2 080409-13菌株基因组DNA的提取

3.2.3 ITS序列的PCR扩增

3.2.4 测序结果

3.2.5 温度对080409-13菌株生长的影响

3.2.6 温度对080409-13菌株产孢量的影响

3.2.7 pH对080409-13菌株生长的影响

3.2.8 pH对080409-13菌株产孢量的影响

3.3 结论与讨论

3.3.1 菌株080409-13的形态特征和ITS序列分析

3.3.2 培养条件对菌株080409-13的影响

4 结论

参考文献

致谢