不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌对血管内皮细胞功能影响的实验研究

摘要

目的：观察不同fimA基因型P．gingivalis对HUVEC产生细胞粘附分子、促炎细胞因子和趋化因子的影响，探讨P．gingivalis在AS发生发展中的可能作用以及作为牙周炎与AS相关的物质基础的可能。 方法：标准条件下厌氧培养ⅠfimA型（ATCC33277）、ⅡfimA型（WCSP115）、ⅣfimA型（WS3）P．gingivalis；体外培养并鉴定HUVEC。待HUVEC单层融合后，分别加入不同fimA基因型P．gingivalis，共同培养2h、6h、24h，采用ELISA测定培养上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α和IL-8、MCP-1的分泌量；FCM检测HUVEC表面ICAM-1和VCAM-1的蛋白表达量并通过CLSM观察ICAM-1和VCAM-1的表达情况。 结果：（1）P．gingivalis刺激下HUVEC表面ICAM-1表达增强，Ⅱ、Ⅳ fimA型P．gingivalis的这种上调作用强于ⅠfimA型P．gingivalis。本研究条件下，Ⅱ、Ⅱ、Ⅳ fimA型P．gingivalis刺激HUVEC表面VCAM-1的表达均较低，差异无统计学意义（P>0．05）。CLSM显示，P．gingivalis刺激下HUVEC可见较多ICAM-1和VCAM-1荧光点表达，其中，Ⅱ、Ⅳ fimA型P．gingivalis刺激下，HUVEC中ICAM-1和VCAM-1荧光点相对较多，分布范围广。 （2）Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ fimA型P．gingivalis刺激HUVEC后，IL-1β、IL-6的分泌量均明显升高，Ⅱ、Ⅳ fimA型P．gingivalis刺激HUVEC分泌IL-1β和IL-6的作用强于ⅠfimA型P．gingivalis。提示fimA基因型的差异可能导致P．gingivalis在调节HUVEC分泌致炎细胞因子的能力存在差异，进而导致内皮系统炎症免疫反应程度不同。 （3）本研究条件下，Ⅱ、Ⅳ fimA型P．gingivalis刺激HUVEC后，TNF-α分泌量明显升高，而Ⅰ fimA型P．gingivalis的这种上调作用不明显。提示Ⅰ fimA型P。gingivalis刺激HUVEC分泌TNF-α的能力可能弱于Ⅱ、Ⅳ fimA型P．gingivalis。 （4）P．gingivalis刺激HUVEC后，Ⅱ、Ⅳ fimA型P．gingivalis调节HUVEC分泌IL-8和MCP-1蛋白量均明显升高。Ⅱ、Ⅳ fimA型P．gingivalis诱导HUVEC分泌IL-8和MCP-1的能力强于ⅠfimA型P．gingivalis。提示fimA基因型的差异可能导致P．gingivalis在诱导HUVEC分泌趋化因子的能力不同，进而导致内皮组织炎症和免疫反应的强度存在差异。 结论：具有不同牙周致病毒力的不同fimA基因型P．gingivalis对HUVEC功能的影响存在差异。ⅡfimA和ⅣfimA型P．gingivalis有较强上调HUVEC表达细胞粘附分子、分泌致炎细胞因子及趋化因子的能力，其作用强于ⅠfimA型P．gingivalis。提示P．gingivalis毒力和致病性与其fimA基因型相关，其中ⅡfimA和ⅣfimA型P．gingivalis可能与AS的发生发展密切相关。

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综述 牙龈卟啉单胞菌在牙周炎与动脉粥样硬化相关性中作用机制的研究

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