JAK2/STAT3信号通路在TAP诱导大鼠胰腺腺泡细胞释放HMGB1中的作用

摘要

目的：通过研究JAK/STAT信号通路是否参与了TAP诱导大鼠胰腺腺泡细胞HMGB1的表达释放，初步探究证实影响急性胰腺炎HMGB1表达释放的信号通路，从而在临床通过抑制信号通路来干扰HMGB1的表达释放，预防炎症加重及诱发SIRS、MODS，为临床预防、治疗SAP等重症炎症性疾病，减少并发症提供新的途径。
　　 方法：将12只SD大鼠处死后，取出胰腺分离胰腺腺泡细胞，将所得细胞悬液等分为4组，①A组：正常对照组②B组：促进组(TAP组)，在胰腺腺泡细胞中加入TAP(终浓度3nmol/L)③C组：抑制组1(JAK2抑制剂-AG490组)，AG490(终浓度25μmol/L)于TAP诱导前1h加入培养细胞④D组：抑制组2(STAT3抑制剂-雷帕霉素)(RPM)组，RPM(终浓度40ng/ml)于TAP诱导前1h加入培养细胞。在3h、6h、12h、24h分别取细胞采样。实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HMGB1mRNA表达；蛋白印迹法(Western-blot)检测HMGB1蛋白质的表达。并用SPSS17.0软件对各组HMGB1mRNA、蛋白的表达量作统计学分析，对各组进行作用时间与HMGB1mRNA表达的线性回归分析。
　　 结果：与A组比较，B组各时间点HMGB1mRNA及蛋白相对表达量显著升高(P<0.01)；与B组比较，C组12h、24h HMGB1mRNA相对表达量显著降低(P<0.01)；12h、24h HMGB1蛋白相对表达量显著降低(P<0.01)；与B组比较，D组6h的HMGB1mRNA降低(P<0.05)，12h、24h显著降低(P<0.01)；12h、24h HMGB1蛋白相对表达量有显著降低(P<0.01)。且B、C、D组其HMGB1mRNA相对表达量随时间的推移呈增高趋势。
　　 结论：TAP可直接诱导胰腺腺泡细胞内HMGB1的释放。AG490与雷帕霉素可抑制TAP诱导胰腺腺泡细胞HMGB1的释放。JAK2/STAT3信号通路参与了TAP诱导胰腺腺泡细胞HMGB1的释放。