反式白藜芦醇对Aβ25-35诱导阿尔茨海默病大鼠海马神经元的保护作用

摘要

目的:观察反式白藜芦醇(Trans-Resveratrol，TR)对Aβ25-35诱导阿尔茨海默病大鼠海马神经元的保护作用，并探讨其可能作用机制。
　　 方法:雄性SD大鼠大鼠随机分为假手术组、阳性对照组（多奈哌齐）、模型组(Aβ25-35)、TR低剂量组、TR高剂量组，给予Aβ25-35海马注射，造模结束后灌胃，每日一次，连续15天。阳性对照组给予多奈哌齐（安理申）1mg/kg，治疗组给予TR低剂量TR10mg/kg，高剂量给予TR40mg/kg。第11天开始行Morris水迷宫检测，第15天处死大鼠取材，HE染色观察海马神经元损伤情况，采用real PCR检测caspase12mRNA表达，采用Western Blot和免疫组化方法，检测caspase8和caspase12蛋白表达。
　　 结果:大鼠海马注射Aβ25-35后，假手术组、阳性对照组（多奈哌齐）、模型组(Aβ25-35)、TR低剂量组、TR高剂量组水迷宫检测在定向航行实验中第一天的逃避潜伏期分别是59.0±18.2，65.2±27.8，98.8±19.9，77.7±20.4，66.6±25.9;第二天的逃避潜伏期分别是25.0±14.5，32.4±21.2，72.8±25.0，52.4±14.8，33.3±15.1;第三天逃避的潜伏期分别是20.3±12.0，25.1±12.9，67.2±17.8，44.8±23.2，26.2±19.7;第四天的逃避潜伏期是10.3±4.8，12.0±5.8，62.6±22.1，30.3±11.5，14.2±4.7;在空间搜索实验中第五天的校正潜伏期分别是32.8±8.4，25.3±5.5，15.6±1.2，21.7±4.8，28.0±4.9。假手术组、阳性对照组（多奈哌齐）、模型组(Aβ25-35)、TR低剂量组、TR高剂量组PCR法检测caspasel2 mRNA的表达量分别为55.70±10.12，91.11±7.06，181.49±38.68，138.43.26±15.28，98.06±23.05; western blot法检测caspase8蛋白的表达量分别为0.18±0.03，0.29±0.02，0.64±0.04，0.57±0.05，0.31±0.03; western blot法检测caspase12蛋白的表达量分别为0.19±0.05，0.29±0.03，0.68±0.03，0.60±0.05，0.32±0.04。大鼠注射Aβ25-35后，与假手术组相比，模型组逃避潜伏期明显延长在定向航行实验验中（P＜0.01)，校正潜伏期明显缩短在空间搜索试验中(P＜0.01)，海马神经元明显受损， Caspase12 mRNA和caspase8蛋白表达明显增加（P＜0.01)。和模型组比较，TR治疗组在定向航行实验中逃避潜伏期明显缩短（P＜0.05)，在空间搜索实验中校正潜伏期明显延长（P＜0.05)，HE染色TR明显减轻了海马神经元损伤，TR显著降低了大鼠海马caspase12 mRNA的表达（P＜0.05)，同时降低了caspase8和caspase12蛋白表达(P＜0.05)。
　　 结论:TR对Aβ25-35致AD大鼠海马神经元有保护作用，其机制可能部分是因为抑制caspase12 mRNA表达、caspase8和caspase12蛋白表达有关。

目录

声明

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摘要

前言

1 材料

1．1 主要实验材料

1．2 主要实验试剂

1．3 主要仪器

2 实验方法

2．1 Aβ25-35制备

2．2 动物分组和给药

2．3 动物模型制备

2．4 水迷宫行为学分析

2．5 观察海马的神经元形态学

2．6 PCR法检测海马caspase12 mRNA表达

2．7 免疫组织化学SABC法检测caspase8和caspase12蛋白的表达

2．8 Western blot法检测Caspase8和Caspase12蛋白表达

2．9 统计学处理

3 结果

3．1 TR对AD模型大鼠学习记忆能力的影响

3．2 TR对Aβ25-35诱导AD大鼠海马神经元形态学的影响

3．3 TR对Aβ25-35诱导AD大鼠海马caspase12 mRNA表达的影响

3．4 免疫组化检测TR对Aβ25-35诱导AD大鼠海马caspase8蛋白表达

3．5 免疫组化检测TR对Aβ25-35诱导AD大鼠海马caspase12蛋白表达

3．6 Western blot法海马caspase8和caspase12蛋白表达

4 讨论

5 结论

参考文献

综述 阿尔茨海默病的发病机制及治疗研究进展

致谢

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