川芎嗪对急性缺血诱导的大鼠心肌细胞凋亡及Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

摘要

目的：研究川芎嗪对急性心肌缺血诱导的大鼠心肌细胞损伤的保护作用与其对心肌细胞的凋亡及凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达的影响，探讨川芎嗪抑制心肌凋亡的作用及可能机制。 方法：对32只成年SD大鼠随机分为四组，每组8只，分别为：假手术对照组、急性心肌梗塞对照组、川芎嗪保护组(Tetramethylpyrazine,TMP,20mg/kg)、普萘洛尔对照组(Propranolol，Prop,2mg/kg)。结扎冠状动脉左前降支建立急性心肌缺血模型，其中16只在结扎冠状动脉左前降支前分别给予川芎嗪和普萘洛尔干预治疗。通过描记Ⅱ导心电图、检测血清中肌酸激酶MB型(CK-MB)及乳酸脱氢酶(LDH)的含量、透射电镜观察病理组织学改变、TUNEL法检测凋亡细胞数目、免疫组化法检测Bcl-2和Bax蛋白表达的变化等，观察以上各指标在急性心肌缺血大鼠的心肌组织缺血过程中不同的时间点(结扎2h、结扎4h)的变化。 结果：1、与急性心肌梗塞对照组相比，川芎嗪20mg/kg和普萘洛尔2mg/kg于结扎冠脉前10min静脉注射，可明显降低急性心肌缺血大鼠心电图J点抬高幅度(P＜0.05)和减少心肌酶的外漏(P＜0.05)。 2、电镜结果显示：大鼠急性心肌缺血2h时，心肌细胞出现缺血性改变。4h时心肌缺血性改变最为明显，可见心肌细胞肿胀、线粒体空泡样变、部分肌纤维溶解。与急性心肌梗塞对照组相比，川芎嗪保护组与普萘洛尔给药组大鼠急性心肌缺血损伤程度有一定的减轻。 3、非缺血心肌无TUNEL阳性细胞出现，急性缺血2h大鼠缺血心肌组织可见TUNEL阳性细胞数明显增多，4h时TUNEL阳性细胞数目进一步增加。与急性心肌梗塞对照组相比，川芎嗪保护组急性缺血心肌组织中TUNEL阳性细胞数明显减少，心肌缺血2h时分别为29.12±3.67个/张(急性心肌梗塞对照组)和21.50±2.88个/张(川芎嗪保护组)(P＜0.05)；4h时分别为41.71±3.73个/张(急性心肌梗塞对照组)和19.00±3.78个/张(川芎嗪保护组)，均有显著性差异(P＜0.001)。 4、急性缺血2h及4h，大鼠缺血心肌Bcl-2蛋白的表达在急性心肌梗塞对照组、川芎嗪保护组和普萘洛尔给药组均明显表达。与急性心肌梗塞对照组相比，川芎嗪保护组Bcl-2蛋白的表达明显升高，2h分别为6.88±0.35(％)(急性心肌梗塞对照组)和11.89±0.74(％)(川芎嗪保护组)，4h分别为7.10±0.35(％)(急性心肌梗塞对照组)和13.18±0.55(％)(川芎嗪保护组)，均有显著性差异(P＜0.001)；与急性心梗对照组相比，Bax蛋白的表达在各个组间各个时间点变化均不明显，无统计学差异(P＞0.05)。 结论：1、急性心肌缺血可诱导心肌细胞凋亡，且随缺血时间的延长，凋亡的心肌细胞数明显增多。 2、川芎嗪与普萘洛尔预处理可抑制心肌细胞凋亡。 3、川芎嗪通过保护心肌细胞线粒体，稳定心肌细胞膜，减少心肌酶的外漏，减轻心肌细胞急性缺血损伤；其机制是使Bcl-2基因表达相对增加，而Bax的表达变化并不明显，Bcl-2/Bax比值升高，减少心肌细胞的凋亡，从而减轻了急性缺血心肌的细胞损伤，有效的保护了缺血心肌。

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分析讨论和意义

结论

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