骨髓、脐血间充质干细胞体外诱导分化为肝样细胞

摘要

目的：探讨EGF和HGF体外诱导肝硬化患者骨髓间充质干细胞(MSCs)，向肝细胞分化的可行性，为自体骨髓干细胞移植治疗终末期肝病打下基础。 方法：取肝硬化志愿者骨髓，密度梯度离心法联合贴壁筛选法获取MSCs，分别用含有HGF、EGF、HGF+EGF或不加生长因子的培养基进行培养。用流式细胞仪、免疫细胞化学法鉴定细胞表型，酶联免疫吸附法检测培养上清液中Alb水平，过碘酸吸附实验行糖原染色。 结果：肝硬化患者骨髓MSCs生长良好，表型为CD29阳性，CD34阴性。诱导组细胞可在21～28 d时，形态变为三角形、多角型或类圆形。诱导组细胞7 d检测到AFP的表达，21，28 d检测出CK18，并见到糖原染色阳性，以时间依赖方式产生Alb。未诱导组在以上时间点未检测到上述指标。 结论 HGF、EGF均能诱导骨髓MSCs分化为肝样细胞，两者在一定程度上具有联合作用。

目录

论文说明：中英文缩略词表

声明

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二、研究背景

三、立论依据

四、研究内容

五、材料与方法

5.1实验材料

5.2主要仪器和设备

5.3实验方法

六、结果

6.1原代及传代MSCs的形态观察

6.2 MSCs表型分子CD44、CD45、CD29、CD34测定

6.3诱导组细胞的形态观察

6.4诱导组细胞中肝细胞标志的表达

6.5 ELISA检测培养上清液中Alb含量

七、讨论

八、结论

九、参考文献

十、在校期间研究成果

十一、致谢