荧光原位杂交技术检测白血病基因异常的研究以及慢性淋巴细胞白血病ZAP-70的表达

摘要

目的：
　　 探讨常规细胞遗传学(conventional cytogenetics,CC)分析、组合探针荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术检测慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)、急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocyticleukemia,APL)患者染色体异常的价值,以及Zeta链相关蛋白-70(zeta chainassociated prorein-70,ZAP-70)在CLL中的表达。
　　 方法：
　　 对CLL患者以及APL患者的外周血标本,加入植物血凝素(phytohemagglutinin A,PHA)刺激白血病细胞的增殖及分裂,采用短期培养法培养72h制备染色体标本；采用常规G显带技术进行常规核型分析；同时应用一组两个探针:GLP ATM(11q22.3缺失),GLP RB1(13q14缺失)对CLL患者进行FISH检测,应用PML/RARa探针对APL患者进行FISH检测；采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测CLL患者CD5+CD19+细胞ZAP-70的表达。
　　 结果：
　　 (1).10例CLL患者CC检测结果显示:2例存在异常；FISH检测结果显示:7例存在一种及一种以上细胞遗传学异常,其中4例存在del(11q22.3)异常,7例存在del(13q14)异常。在4例CC结果核型正常的CLL患者中,应用组合探针FISH技术检测显示1例患者未检测出异常,3例存在异常；2例CC异常核型的患者中,FISH技术均检测出异常；4例CC未见分裂象的CLL患者中,应用FISH技术检测发现2例患者未检测出异常,1例存在单一的del(13q14)异常,1例两种异常同时存在。3例APL患者CC检测结果显示:均有t(15；17)的存在；FISH检测结果显示:3例均检测出PML/RARa融合基因。
　　 (2).10例CLL患者中,2例ZAP-70蛋白表达≥20％,8例表达<20％。
　　 结论：
　　 由于CLL白血病细胞有丝分裂行为低下,虽加入PHA刺激剂,CC的染色体异常检出率仍很低。(1).FISH技术大大提高了白血病患者染色体异常的检出率；(2).FISH技术可在短时间内分析大量的中期和间期细胞,因而可用来检测APL的微小残留病(minimal residual disease,MRD)；(3).ATM基因缺失的CLL患者多处于临床分期的晚期；(4).遗传学异常在B-CLL中属高发事件。

目录

文摘

英文文摘

研究背景

第一部分 FISH技术检测急性早幼粒细胞白血病及慢性淋巴细胞白血病基因异常

材料与方法

结果

讨论

第二部分 慢性淋巴细胞白血病ZAP-70的表达

材料与方法

结果

讨论

全文总结

参考文献

缩略词表

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